分析化学、教学服务模块 吸附薄层色谱分离原理、课件 吸附薄层色谱分离原理.pptxVIP

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吸附薄层色谱分离原理 宜春职业技术学院 王宜萍 薄层色谱法概述 吸附薄层色谱分离原理 固定相涂铺或结合在平面载体上,组分的分离在平面上进行,这样的液相色 谱法被称为平面色谱法。 吸附薄层色谱分离原理 快速 展开一次只需几分钟到十几分钟。 灵敏 只需几微克至几十微克的物质就能检出。 高选择性 能分离结构相似的同系物、异构体。 操作简便 所用仪器简单,一般实验室均能开展工作。 显色简便 展开后可选用不同的显色剂喷雾显色,有助于定性鉴别。 02 章节 PART 分离原理 吸附薄层色谱分离原理 展开(分离) 点样 展开剂 薄层色谱 吸附薄层色谱分离原理 吸附薄层色谱分离原理 分离原理: 展开剂在毛细管的浸润作用下,带着各组分沿着薄板向前移动。 当各组分通过吸附剂时,被测组分在吸附剂和展开剂之间不断发生吸附——解吸附, 不同组分的吸附能力和解吸附能力不同,因此产生差速迁移。 吸附系数大的移动慢,吸附系数小的移动快,从而达到分离的目的。 吸附薄层色谱分离原理 比移值(Rf) 原点到斑点中心的距离 原点到溶剂前沿的距离 Rf l0 l1 Rf l0 l2 0 ≤ Rf ≤ 1 Rf 可用范围:0.2-0.8 Rf 最佳范围:0.3-0.5 在色谱条件确定的情况下,K大Rf 小,K小Rf 大 吸附薄层色谱分离原理 分离物质性质 Rf 影响因素 薄层板性质 展开剂 极性 温度 展开剂蒸气饱和程度 吸附薄层色谱分离原理 相对比移值Rr 参考物与被测组分在完全相同条件下展开,可以消除系统误差,大大提高重现性和可靠性; 原点到斑点中心的距离 原点到溶剂前沿的距离 Rr Rf(参) Rf(组) 参考物可以是后加入纯物质,也可是样品中已知组分; 相对比移值Rr可以大于或小于1;Rr的重现性和可比性比Rf好。 03 章节 PART 固定相和流动相的选择 吸附薄层色谱分离原理 但薄层色谱所用的固定相颗粒更细,粒度更均匀,所以分离效能更高。 吸附薄层色谱法的固定相又称为吸附剂,薄层色谱的固定相与吸附柱色谱的固定相类似 分离极性较强的化合物时,选用活性较小的吸附剂。 分离弱极性化合物,选择吸附活性较大的吸附剂; 吸附薄层色谱分离原理 硅胶G 硅胶 + 煅石膏 硅胶H 硅胶(不含黏合剂) 硅胶HF254 硅胶H + 荧光物质 硅胶GF254 硅胶G + 荧光物质 薄层色谱法常用的吸附剂有:硅胶、氧化铝、聚酰胺等 硅胶:40μm, 200目左右 吸附薄层色谱分离原理 组分极性 吸附剂活度 流动相极性 大 小 大 小 大 小 吸附薄层色谱分离原理 分离混合样品时,先用单一中等极性展开剂尝试,再摸索二元展开剂。 问:A、B哪个组分的极性大? B的极性大。展开剂极性增大,极性大的Rf 值增大。 例:A,B两组分的试样 展开剂 Rf(A) Rf(B) 分离效果 苯 0.45 0.42 差 苯+甲醇 0.38 0.52 优 THANK YOU

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