探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化的调节.docxVIP

探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化的调节 摘要： 目的：研究姜黄素在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中能否减少肾 问质中转化生长因子 6 1 (transforming growth factor- 6 1,TGF-0 1)和结缔 组织生长因子(connective tissue growth factor , CTGF的表达。方法：将 30只大鼠随机分为3组，每组10只：假手术组、模型组、姜黄素组。模型组和 姜黄素组行右侧输尿管接扎术，假手术组只游离不接扎。术后第 14天处死各组 中的大鼠，检测血液尿素氮(BUN、血活肌酸酊(Scr)。用免疫组织化学方法测 定TGF-0 1、CTGF勺表达情况，同时采用 Masson染色，观察肾脏病理情况。结 果：姜黄素降低了 BUNScr的含量，同时姜黄素显著减少了大鼠肾问质 TGF-0 1、 CTGFF勺表达，并有效改善了肾脏的病理学损伤。 结论：姜黄素可以减少输尿管 梗阻后TGF-0 1、CTGFF勺表达，从而改善UU顷致的肾脏损伤，提示姜黄素可能 有延缓慢性肾脏疾病纤维化进程的潜能。 关键词： 输尿管梗阻； 纤维化；姜黄素；免疫组织化学； 大鼠， Spragua-Dawley;肾问质 肾问质纤维化几乎是所有慢性肾脏疾病进行性发展的共同 最终通路，延缓肾问质纤维化的发展，可降低终末期肾病 (ESRD*勺发生率［1］。 姜黄素是姜黄中提取的一种植物多酚，也是姜黄发挥药理作用最重要的活性成分。 近年来的研究不仅证明了姜黄的传统作用， 而且还揭示出一些新的药理作用，如 抗炎、抗氧化、活除氧自由基、抗人类免疫缺陷病蠹、保护肝脏和肾脏、抗纤维 化以及防癌抗癌等作用，而且无明显的蠹副作用［2］。20XX年5~8月研究了姜 黄素抑制肾问质纤维化的作用机制，其中重在研究姜黄素对在单侧输尿管梗阻 (UUO模型大鼠中肾问质中转化生长因子 0 1 (transforming growth factor- 0 1,TGF- 0 1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor , CTGF的影响，希望在临床上研制出有效药物。 材料与方法 材料 雄性、无特定病原体动物级(specific pathogen free, SPF )、 Sprague-Dawley大鼠［同济医学院动物中心提供，生产许可证： SCXK(鄂) 20XX-0028］30只，7 w龄，体重(土)g。动物房饲养环境为每笼 6只，每24 h 换1次垫料，喂以正常饮食，自由进水，温度为(24± 2) C,相对湿度为(45± 3) % 姜黄素纯度为＞ 95%(美国Sigma公司)；兔抗大鼠TGF-0 1、CTGF多克隆抗体 及SP免疫试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)。 方法 造模 适应性饲养1周后，按照完全随机设计方法，以体重由轻到 重的顺序编号用随机排列表法分为假手术组、模型组、姜黄素组各 10只。假手 术组和模型组每天给予蒸僻水2 ml灌胃，姜黄素组将姜黄素粉末（200 mg?kg-1 - d -1 ）混悬:于2 ml蒸僻水中灌胃，术前1 d开始给药。造模方法：模 型组和姜黄素组行右侧输尿管结扎术，质量浓度为20 g/L戊巴比妥钠（50 mg/kg） 腹腔注射麻醉后，行正中竖切口打开腹腔，分离右侧输尿管并行双结扎，假手术 组只分离但不结扎。于术后第14天处死所有大鼠，处死前下腔静脉取血 3 ml 做血生物化学检验并行肾原位灌流去除血细胞。 取右侧肾脏，纵切为两部分，一 部分用体积分数为4%勺多聚甲醛溶液浸泡24 h做病理及免疫组织化学检测，另 一部分速冻于-70 C冰箱。 BUM Scr检测 采用自动生化分析仪（BeckmanCX3Delta）进行BUN Scr的检测。 免疫组织化学检查 SP法检测肾组织中的TGF-0 1、CTGF8达， 按SP试剂盒说明书进行。每张切片不含肾小球的肾小管问质区域，随机选取 8 个高倍镜视野（400倍），用免疫组织化学分析软件系统 HMIAS-20XX?活晰度彩 色医学图文分析系统（同济医学院活屏影像公司）对所选视野内的棕黄色阳性信 号进行图像分析，计算各组大鼠肾组织TGF-6 1、CTGF勺平均阳性表达率，即棕 黄色阳性信号占整个视野的白分比。 肾组织病理检查 右侧肾组织行Masson染色，光镜观察肾问质纤 维化情况。问质纤维化定量分析也借助 HMIAS-20XX?活晰度彩色医学图文分析 系统，取Masson染色切片，每张切片观察8个不含肾小球，互不重叠的问质高 倍镜视野（400倍），计算每张切片肾问质绿染面积占整个视野的白分比。 统计学方法 采用统计软件处理数据，计量数据采用（x 土 s）表示，组问比较用单因素 方差分析和两两比较用q检验，P＜为差异具有统