电镜技术一ppt参考课件.ppt

纤维素酶的免疫金标记，定位在细胞壁上 * 真菌表面抗原胶体金双标记（5nm和16nm） * 3. 生物材料的X射线元素分析 （1）细胞内元素（环境污染导致铜、铝、铅、镉等 重金属积累） （2）细胞化学产物的X射线分析 * 大豆根细胞（铬污染） * 黄瓜叶片细胞（镉污染） * 4. 结构生物学 研究方法 研究对象 研究尺度 电子晶体学 二维晶体、纤维或 生物大分子 （周期排列） 管状晶体 单颗粒技术 单颗粒生物大分子 生物大分子复合体 （全同粒子） 及复合体、病毒等 电子断层成像术 超分子复合体、细 亚细胞水平 （单一结构） 胞器、亚细胞结构 * 仪器名称：场发射枪透射电子显微镜 制造厂家：美国ＦＥＩ公司 仪器型号： Tecnai F30 S-TWIN 分 辨 率: 点分辨率 0.20 nm 　　　 线分辨率 0.10 nm 信息分辨率0.14nm HR STEM分辨率0.17nm EDX分辨率136eV 附 件： EAGLE CCD相机　　 Gatan 626 冷冻传输杆。 　　? 三维重构 　　 EDXA 能谱一台 最高加速电压：300KV 放大倍数:TEM 模式 60X—1000KX HAADF STEM模式 200X—100M 本电镜适用于对纳米材料，金属材料及金属基复合材料，陶瓷材料，高分子材料等的原子尺度结构和成分的研究． 测试中心电镜设备介绍 * 测试中心电镜设备介绍 仪器名称：透射电子显微镜 生产厂家：荷兰Philips公司 仪器型号：CM100 主要附件： Gatan 794 CCD 性能指标： 点分辨率： 0.34nm 最高加速电压： 100KV 最大放大倍数：45万倍 * 分辨率 0.1nm 超高压透射电镜 JEM-ARM1250 * 一、材料科学: 高分辨率、高性能、成份和结构分析 （物理、化学、化工、冶金、材料、半导体、地质、矿产、 石油、纺织、轻工、考古、航天、外贸……） 二、生命科学: 中等分辨率、保真性、生化物质定位 （生物学、医学、药学、法医学、农业、林业、畜牧业、 水产、环保、食品……） 电镜两大应用领域： * 各种生物体的大小尺度 * 显微镜可观察到组织水平 分辨率局限于200nm * 激光共聚焦显微镜观察活细胞内生化物质荧光定位 * * 更小的亚细胞结构和病毒等微生物必须用电镜观察！ * 透射电镜观察研究的各种细胞器 内质网（Porter, Claude, Fullan, 1945） 叶绿体（Porter, Granick, 1947） 高尔基体（Dalton, Felix Sjostrand, 1950） 核膜（Callan , Tomlin, 1950） 溶酶体（de Duve, 1952） 线粒体（Palade, Porter, Sjostrand, 50年代初） 核糖体（Palade, 1953） 单位膜（Robertson, 1958） * 目前，用于生命科学研究的电子显微学发展有两个趋势。 一是向更微细的结构，生物分子和原子水平发展。电镜已成为分子生物学、分子遗传学非常重要的研究工具之一，用于细胞生物学、生物分子结构与功能关系以及抗原、抗体、蛋白质、DNA定位等研究，例如对微管分子的研究、膜抗原的超微定位、膜抗原基因对核及细胞骨架系统蛋白质组成的影响、细胞核内DNA、组蛋白、非组蛋白的分子观察和定位以及核孔复合体识别蛋白质的观察等等，都取得了非常突出的进展。 另一个重要趋势是向更普及的应用方向发展，如农林、医药、动植物学等。在应用方面最引人注目的是病理诊断电子显微学。它已成为一些病毒，如某些肿瘤和病毒病诊断上必不可少的工具。自从微波技术引入诊断电镜学以后，病理样品从取材到电镜观察只需2小时左右；免疫电镜、电镜组化等技术均已引入常规诊断学中。　 * 当前生物电镜应用的主要方向： 生物微结构形态研究 生化物质和基因产物细胞定位 生物材料的X射线元素分析 结构生物学 透射电子显微镜的应用 * TEM样品的制备 生物样品常规制样技术 超薄切片技术：取材、固定、清洗、脱水、浸透、包埋、切片及染色等步骤。 负染色技术：利用高密度的、且在透射电镜下又不显示结构的