生物分离与纯化技术.docx

生物分离与纯化技术 生物纯化篇一：生物分离与纯化技术期末材料 一．填空题 生物分离与纯化的一般工艺过程：原料的选取与预处理，分离提取，精制和成品制作 预处理的目的： 1. 改变发酵液（培养液）的物理性质，以利于固液分离。方法：加热，凝聚和絮凝 2. 去除发酵液（培养液）中的部分杂质以利于后续各步操作微滤的操作模式： 常规过滤，错流过 滤 液膜的组成：膜溶剂（水和有机溶剂），表面活性剂，流动载体和膜增强剂 液膜的分类：乳状液膜（流动载体液膜和非流动载体液膜） ，支撑液膜 液膜分离的操作过程：制备液膜，液膜萃取，澄清分离，破 乳 常见的膜分离过程： a 渗析 b 电渗析 c 微滤 d 超滤 e 反渗透 f 纳滤 g 气体分离 过饱和溶液制备的四种方法： 饱和溶液冷却，部分溶剂蒸发，化学反应结晶法，解析法 离子交换树脂的命名：第一位数字代表产品的分类，第二位代表骨架，第三位代表数字为顺序号 双水相萃取的工艺流程：目的产物的萃取， PEG的循环，无机盐的循环 二．名词解释 超临界流体萃取：是一种新型的萃取分离技术，是利用超临界流体作为萃取剂， 对物质进行溶解的和分离的过程。 2. 交联度和交换容量的定义： 1. 表示离子交换树脂中交换剂的容量， 如聚苯乙烯型 树脂，交联度以二乙烯苯在树脂母体总质量中所占百分数表示 2. 是每克干燥的离子交换树脂或每毫升完全溶胀的离子交换树脂所能吸 附的一价离子的毫摩尔数， 是表示树脂离子交换能力的主要参数， 实际上是表示树脂活性基团的数量多少的参数。 浓缩：低溶度溶液通过除去溶剂变为高溶度溶液的过程干燥：从湿的固体生化药物中除去水分或溶剂而获得相对或绝对干燥制品的工艺过程。 4. 盐析：是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。 有机溶剂沉淀法：利用与水互溶的有机溶剂 ( 如甲醇、乙醇、丙酮等 ) 能使蛋白质在水中的溶解度显著降低而沉淀的方法 色谱法：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物的中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中 中毒：由于活性炭是一种强吸附剂，对气体吸附能力很大，气体分子占据了活性炭的吸附表面，会造成活性炭中毒 大网格聚合物吸附剂：又名大孔吸附树脂，是一种有机高聚物，具有与大网格离子交换树脂相同的大网格骨架， 一般为白色球形颗粒。 正反相色谱的定义：正：流动相极性小于固定相的分配色谱法，反：流动相极性大于固定相极性的分配色谱法 三．简答题 一．生物分离与纯化技术的特点 1. 目的产物浓度低，纯化难度 大原料液中目的产物的浓度一般都很低，有时甚至是极微量的2. 活 性物质性质不稳定， 操作过程易失活， 生物物质的生理活性大多是在生物体内的温和条件下维持并发挥作用的， 目的产物大多数对热酸碱 重金属 PH以及多种理化因素都比较敏感，容易失活。 3. 生物材料中 生化组分数量大，分离困难目的产物与杂质的理化性质如溶解度相对 分子质量等电点等往往比较相近，所以分离与纯化较难 4. 生物材料 容易变质，保存困难，生物材料容易腐败，染菌，被微生物的活动所分解或被自身的酶所破坏，甚至机械搅拌，金属器械，空气，日光等对生物物质的活性都会发生影响 5 生物产品质量标准高， 生物产品一般用作医药，食品和化妆品，与人类生命息息相关。因此要防止有害物质在操作过程中进入。 二．生物分离与纯化的发展方向： 1. 研究和开发新型和经济高效的分离纯化技术（ 1）新型分离介质的研制，分离介质的性能对提高分离效率起到关键作用， 特别是工业大生产， 介质的机械强度是工艺设计时要考虑的重要因素（ 2）膜分离的推广应用，膜分离具有选 择性好，分离效率高，节约能耗等优点。（ 3）提高分离过程的选择性，主要是应用分子识别与亲和作用来提高大规模分离技术的精度， 利用生物分离作用的高度特异性与其他分离技术如： 膜分离，双水相 萃取等。（ 4）强化生物分离过程的研究，生物分离过程的优化能产 生显著的经济效益， 但大多数生物分离过程目前尚处于经验状态， 对其机理缺乏必要的认识 2. 生物工程上游技术与下游技术相结合，生物工程作为一个整体，上，中，下游要互相配合，为了利于 目的产物的分离与纯化，上游的工艺设计应尽量为下游的分离 纯化创造条件。 三．杂质的去除方法 1. 杂蛋白的去除方法 a 等电沉淀法，蛋白质在等电点时溶解度最小， 能沉淀而除去 b 变性沉淀，蛋白质从有规 则的排列变成不规则结构的过程称为变性， 变性蛋白质在水中的溶解 度较小而产生沉淀 c 吸附利用吸附作用能有效的除去杂蛋白质 2. 不 溶性多糖的去除方法， 当发酵液中含有较多不溶性多糖时， 粘度增大， 固液分离困难，可用酶将它转化为单糖一提高过滤速度 3. 高价金属 离子的去除方法，去除钙离子，常用草酸钠或草酸，去除镁离子