生物化学第十一章 遗传信息传递与表达11.1 新建课程目录.pptVIP

1、氨基酸的活化与转运 2、肽链的生成 3、肽链合成后的加工和修饰 二、蛋白质的生物合成过程 氨基酸+tRNA 氨基酰-tRNA ATP AMP+ppi 1、氨基酸的活化与转运 氨基酰-tRNA合成酶 2、肽链的生成 起始 延长 终止 起 始 3、大亚基结合 2、起始tRNA结合 1、mRNA就位 延 长 2、转肽 3、移位 1、氨基酰tRNA结合 终 止 N-端甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸的切除 部分肽段的水解切除 氨基酸残基的修饰 新生肽链的折叠 亚基的聚合 辅基连接 3、肽链合成后的加工和修饰 基因工程亦称遗传工程，即利用DNA重组技术的方法，把DNA作为组件，在细胞外将一种外源DNA（目的基因）和载体DNA重新组合连接（重组），最后将重组体转入宿主细胞，使外源基因DNA在宿主细胞中，随细胞的繁殖而增殖（cloning，克隆），或最后得到表达，最终获得基因表达产物或改变生物原有的遗传性状。 第四节 genetic engineering 克隆羊多利的诞生 胚胎羊 乳腺上皮细胞（提供DNA） 母羊 除去细胞核的卵母细胞（受体） 体外融合 植入受体母羊 1、体外基因重组 目的基因的制备 载体的构建：质粒或 　　噬菌体 目的基因与载体重组 2、重组体DNA的转化增殖和表达 ? 转化 ? 筛选? 增殖和基因表达 基因工程的操作技术 靶序列 变性、引物复性 变性、引物复性 链延伸 链延伸 循环1 Tag酶 循环2 Tag酶 循环3 Tag酶 循环4 Tag酶 循环5 Tag酶 三、PCR技术原理示意图 第二节 RNA的合成 RNA 生成方式 二、RNA的复制 一、转录 一、转录（DNA指导下RNA的合成） 3、RNA转录后的加工 2、RNA合成过程 1、转录的体系 1、转录体系 转录是以双链DNA中的确定的一条链（模板链用于转录，编码链不用于转录）为模板，以ATP、CTP、GTP、UTP四种核苷三磷酸为原料，在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。 RNA的转录从DNA模板的特定位点开始，并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。 启动子（promoter) 终止子(terminator) 模板链（templatte strand） 编码链(sense strand) 非信息区 DNA 5′ 5′ 3′ 3′ 不对称转录 基因 模板链 编码链条 5′ 3′ 5′ 3′ 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 ? ? ? ? ?? 核心酶(α2ββ?) 起始因子 β?——和模板DNA结合 β——起始和催化聚合反应 α——？ 全酶(αββ? ?) RNA聚合酶催化的反应 A C G A C G U U 模板DNA 5′ 3′ 5′ 3′ 新合成RNA 复 制 转 录 模 板 DNA双链 DNA一条链中的一段 原 料 dNTP NTP 引 物 需要 不需要 酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产 物 DNA RNA 配 对 A—T G—C A—T、U G—C DNA 复制和转录的比较 起始 双链DNA局部解开 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 启动子（promoter) 终止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 2、RNA合成 RNA链的延伸图解 RNA链的延伸图解 3′ 5′ RNA-DNA杂交螺旋 聚合酶的移动方向 新生RNA 复链 解链 有义链 模板链（反义链） 延长部位 原核生物中rRNA前体的加工 3、RNA合成后加工 tRNA前体分子的加工 RNAaseP RNAaseF RNAaseP RNAaseF RNAaseD RNAaseD ACC ? ? ? 表示核酸内切酶的作用 表示核苷酸转移酶的作用 表示核酸外切酶的作用 表示异构化酶的作用 c、修饰：形成稀有碱 基如DH2 。 b、末端添加：3’端 添加CCA序列。 a、切除tRNA前体两端 多余的序列：5’端 切除几到10个核苷酸。 酵母菌tRNA前体的加工 tRNA前体 成熟tRNA 加工 真核细胞mRNA的加工 5′ “帽子” PolyA 3′ 顺反子(cistron ) m7G-5′ppp-N-3 ′ p AAAAAAA-OH ? 5′端接上一个“帽子”(CAP)结构 ? 3′端添加PolyA“尾巴”,由