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酶 化 学 练 习 题
一、填空题
1. 酶促动力学的双倒数作图法,得到的直线在横轴上的截距为( -1/Km ),纵轴上的截距为( 1/Vmax )。
2. 判断一个纯化酶的方法优劣主要依据是酶的(总活力的回收)和(比活力提高的倍数)。
二、判断题
1、Km是酶的特征常数,在任何条件下,Km是常数。 √
2、一种酶有几种底物就有几种Km. ×
3、增加不可逆抑制剂的浓度,可以实现酶活性的完全抑制. √
4、正协同效应使酶促反应速度增加,使酶与底物亲和力增加,使酶促反应速度对底物浓度变化越来越敏感。 ×
5、竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。 ×
6、竞争性可逆抑制剂抑制程度与作用时间有关。 ×
三、选择题
1、哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度?( B )
(A)不可逆抑制作用 (B)竞争性可逆抑制作用 (C)非竞争性可逆抑制作用
(D)反竞争性可逆抑制作用 (E)无法确定
2、酶竞争性可逆抑制剂可以使( C )
(A) Vmax 减小,Km减小;(B) Vmax增加,Km增大(C) Vmax不变,Km增加;(D) Vmax 不变,Km减小 (E) Vmax 减小,Km增加;
3、下列常见抑制剂中,除哪个外都是不可逆抑制剂?( A )
(A)有机磷化合物 (B)有机汞化合物 (C)有机砷化物(D)氰化物(E)磺胺类药物
4、在生理条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H+的供体?( )
(A)His的咪唑基(B)Lys的ε氨基(C)Arg胍基(D)Cys的巯基(E)Trp的吲哚基
简答题
1、羧肽酶是由307个氨基酸残基构成的单链蛋白质,该酶活性部位的Arg145和Glu270是它的两个必需的残基。请分析下列问题。
(1)在该酶活性部位实际的催化反应中,这两个氨基酸残基间的空间距离很短,只有十几个纳米。请你解释其中的原因。
(2)为确定该酶对底物的Km和Vmax,获得下面一组数据。请你计算出该酶的Km和Vmax。
[S](M) ν(μM/min) [S](M) ν(μM/min)
2.5×10-6 28 4.0×10-5 112
4.0×10-6 40 1.0×10-4 128
1.0×10-5 70 2.0×10-3 139
2.0×10-5 95 1.0×10-2 140
2、分离到一个蝙蝠唾液来源的ATP酶,当酶浓度为10-8 mmol/L时,ATP的水解速率如下:
[ATP](μmol/L) 5.0 1.7 1.0 0.7 0.56
V (μmol/L/min) 2.6 1.95 1.7 1.4 1.24
确定酶的Km, Vmax, Kcat
3.焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸,其相对分子质量为120×103,由6个相同亚基组成。纯酶的Vmax为2800 U/mg酶。它的一个活力单位规定为:在标准测定条件下,37℃,15min内水解10μmol焦磷酸所需要的酶量。问:
(1)每mg酶在每秒钟内水解多少mol底物?
(2)每mg酶中有多少mol的活性部位(假设每个亚基上有一个活性部位)?
(3)酶的转换数是多少?
4. 称取25mg蛋白酶粉配制成25ml酶溶液,从中取出0.1ml酶液,以酪蛋白为底物,用Folin-酚比色法测定酶活力,得知每小时产生1500μg酪氨酸。另取2 ml酶液,用凯氏定氮法测定蛋白氮为0.2mg,若以每分钟产生1μg 酪氨酸的酶量为1个活力单位计算,根据以上数据,求出:
(1)1ml酶液中所含蛋白质量及活力单位
(2)比活力
(3)1g酶制剂的总蛋白含量及总活力
5. 某酶的初提取液经过一次纯化后,经测定得到下列数据:试计算比活力、百分产量和纯化倍数
6.焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸,其相对分子质量为120×103,由6个相同亚基组成。纯酶的Vmax为2800 U/mg酶。
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