酶工程课件笔记整理.pdfVIP

1. 菌种的选育 2. 培养基的成分和条件的调控 3. 发酵方法 4. 特殊措施 1.某些商业酶的诱导 酶 底物 诱导 α-淀粉酶 淀粉 淀粉或麦芽 糊精 葡萄糖淀粉 淀粉 麦芽糖或异 2.酶的生产方法： 酶 麦芽糖 提取分离法，生物合成 法，化学合成法 3. 产酶菌种的基本要求 不是致病菌 发酵周期短,产酶量高 不易变异退化 最好是产生胞外酶的菌种,利于分离 对医药和食品用酶,还应考虑安全性 凡从可食部分或食品加工中传统使用的微生物生产的酶,安全! 由非致病微生物制取的酶,需作短期毒性实验 非常见微生物制取的酶,需做广泛的毒性实验,包括慢性中毒实 验 4.菌种的分离 高产酶的菌种收集：土壤；发酵生产材料；菌种保藏中心 ATCC 富集培养：预处理-选择性培养基，抑制剂 （霉菌-青霉素等 抗生素） 菌种纯化：平板划线法，稀释法 产酶性能测定：包括初筛和复筛，初筛是从已分离出来的菌 种中挑出包含目的酶的菌株，复筛是在初筛的基础上筛选产 酶量高、性能更符合要求的菌株。初筛要求检出方法快速、 简便；复筛则要求测定方法相对地精确。 酶活检测定义:是对酶功能的检测. 酶活检测是探测酶催化反应的化学机理,并使其可视化.如光信 号,底物颜色变化,或者是生物选择. 所得即所筛! 笔记：一微生物菌种的分离：1含菌样品的收集 2富集培养 3菌种纯化 二 微生物菌种的筛选：1.初筛 2.复筛 酶工程的四个目标：认识酶，改造酶，创造酶， 二、发酵工艺条件及控制 • 1.酶的发酵生产要求 • ①性能优良菌种 （产率，稳定性，发酵周期，营养要求，副产 物，安全性） • ②满足菌种生长需求(菌体是物质基础）； • ③满足菌种产酶需求 （不同条件：温度pH等）。 • 2 ．酶发酵生产的工艺流程 • 保藏菌种 （方法）菌种活化 （复壮）菌种扩大培养发酵分离纯化 酶 发酵过程中培养基pH 的变化由菌种的特性、培养基组分、发酵条件等 决定，引起pH变化的主要原因：微生物对培养基营养成份的利用和代 谢产物的积累。 1. 生长繁殖最适pH （一般情况下） 细菌、放线菌6.5～8.0; 霉菌、酵母菌 4.0～6.0，植物细胞 5～6 2.发酵方法：1. 固体培养 2. 液体深层发酵 3分批发酵 （传统发酵）