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《临床色谱质谱检验技术》
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第三章 色谱柱技术及
生物样品制备技术
《临床色谱质谱检验技术》
主要内容
一、复习
二、常用样品制备技术
三、自动化制备技术
四、小结不思考
《临床色谱质谱检验技术》
一、复习
复习
蛋白沉淀法癿原理及沉淀剂?
液液萃取癿基本原理?
二、常用样品制备技术
常用样品制备技术
衍生化
固相萃取 稀释
样品制备
蛋白沉淀
过滤
离心
液液萃取
(一)固相萃取(solid-phase extraction,SPE )
定义
是一种基于液相色谱分离的样品制备方法,依据样品基质各种组分在固定相
和流动相间分配系数的丌同,使目标分析物得以保留和净化,同时选择性地
去除样品基质中的干扰成分。
名称:C18-n (未封端)
基质:硅胶?聚合物基质?
孔径:60Å
粒径:40-75μm
含碳量:12%
表面积:300㎡/g
键合相:碳十八烷基
作用机理:反相萃叏
(一)固相萃取
SPE原理
利用萃叏小柱,固相吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附 ,使干扰杂质随
样品溶剂或洗涤液流出;或者保留杂质,目标分析物丌被保留而自然流出,
达到分离和和净化样品的目的。
流动相
固定相
被测物A
B 被测物 B
A
(二)固相萃取
SPE分离模式
分离模式 工作原理 相互作用力 键合相
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