2021年选修易考知识点背诵.docVIP

选修3易考知识点背诵 专题1 ? 基因工程 基因工程概念 基因工程是指根据大家愿望，进行严格设计，经过体外DNA重组和转基因技术，给予生物以新遗传特征，发明出更符合大家需要新生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程基础工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）起源：关键是从原核生物中分离纯化出来。 （2）功效：能够识别双链DNA分子某种特定核苷酸序列，而且使每一条链中特定部位两个核苷酸之间磷酸二酯键断开，所以含有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）比较： ①相同点：全部缝合磷酸二酯键。 ②区分：E·coliDNA连接酶起源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补黏性末端之间磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端之间效率较低。 (2)和DNA聚合酶作用异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有核苷酸片段末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 （1）载体含有条件：①能在受体细胞中复制并稳定保留。 ②含有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③含有标识基因，供重组DNA判定和选择。 （2）最常见载体是质粒,它是一个裸露、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并含有自我复制能力很小双链环状DNA分子。 （3）其它载体： 噬菌体衍生物、动植物病毒 (二)基因工程基础操作程序 第一步：目标基因获取 1.目标基因关键是指： 编码蛋白质基因 。 2.获取目标基因方法 （1）从基因文库中获取目标基因 ①基因文库：将含有某种生物不一样基因很多DNA片段，导人受体菌群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物不一样基因，称为基因文库。 基因组文库：含有一个生物全部基因 ②种类 部分基因文库：（ 如cDNA文库）含有一个生物一部分基因 （2）利用PCR技术扩增目标基因 (PCR是多聚酶链式反应缩写) ①原理：DNA双链复制 ②过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链合成。 (3)人工合成法：基因比较小，核苷酸序列又已知，能够经过DNA合成仪直接人工合成。 第二步：基因表示载体构建 1.目标：使目标基因在受体细胞中稳定存在，而且能够遗传给下一代，使目标基因能够表示和发挥作用。 2.组成：目标基因＋开启子＋终止子＋标识基因 （1）开启子：是一段有特殊结构DNA片段，在基因首端，是RNA聚合酶识别和结合部位，能驱动基因转录出mRNA，最终取得所需蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构DNA片段 ，在基因尾端。 （3）标识基因作用：是为了判别受体细胞中是否含有目标基因，从而将含有目标基因细胞筛选出来。常见标识基因是抗生素抗性基因。 第三步：将目标基因导入受体细胞_ 1.转化概念：是目标基因进入受体细胞内，而且在受体细胞内维持稳定和表示过程。 2.常见转化方法： 将目标基因导入植物细胞：采取最多方法是 农杆菌转化法，(Ti质粒T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上)；其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。 将目标基因导入动物细胞：最常见方法是 显微注射技术。此方法受体细胞多是 受精卵。 将目标基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ，最常见原核细胞是 大肠杆菌 ，其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为 感受态细胞 ，再将 重组表示载体DNA分子 溶于缓冲液中和感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表示载体受体细胞依据是标识基因是否表示。 第四步：目标基因检测和判定 1.首先要检测 转基因生物染色体DNA上是否插入了目标基因，这是目标基因能否在受体细胞中稳定遗传关键。检测方法是采取 DNA分子杂交技术。 2.其次还要检测 目标基因是否转录出了mRNA，检测方法是采取 分子杂交技术。 3.最终检测 目标基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用对应 抗体进行抗原－抗体杂交。 4.有时还需进行 个体生物学水平判定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 （三）基因工程应用 1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物品质。 2.动物基因工程：提升动物生长速度、改善畜产品品质、用