表面活性剂在金免疫层析中地地作用.docxVIP

况来看，有一定开发经验的研发人员一般会在 0.2％－ 2%的浓度范围内设立一定的浓度 梯度，确定最适浓度。而且在我们的 HBsg-302s 基础性试验最终确定的最适浓度 S9 10mg/ml ， S14 10% 就在此范围内。在使用过程中最好要控制表面活性剂的浓度，不要一位追求高灵敏度。 添加该表面活性剂浓度不宜过高。 比如前面说到的 S20(Tween 80) 和 S21(Brij 35) ，因为 它们分子结构中 PEG 长链带来过多的的空间位阻， 从而会影响了活性蛋白之间的作用， 降低产品的灵敏度。当然过高的表面活性剂浓度，即使不会降低产品灵敏度，但是会给 以后实际批次生产产品带来不曾预料的麻烦，而且会增加产品的实际成本。还有一点就 是大多数表面活性剂的粘度较大，一旦在样品垫中添加的浓度太大，会影响样本在测流 检测时的流速，从而影响产品的性能。所以表面活性剂的浓度还是需要认真考虑综合个 方面因素，才能确定最终使用浓度。 当然一旦在研发过程中或是在实际生产过程中， 若是发现仅仅添加一种表面活性剂仍然 不能使产品达到一定的灵敏度时，就会选择使用混合表面活性剂。因为选用两种表面活 性剂考察对产品的作用已经是较为庞大的过程， 所以一般不推荐使用三种或三种以上的 表面活性剂。 研究报道，混合表面活性剂体系的性能往往优于单一表面活性剂 [5～ 8],因而可以通过 复配得到性能优良的产品，同时可降低使用成本。 但是在实际产品开发过程中，一般在 单配方表面活性剂的玻纤达不到产品要求时， 才会考虑使用混合表面活性剂体系的玻纤。 而且一般只会选择两种。 通常会在前面提起的五中常用表面活性剂中筛选一种再配上吐 20。由于对于混合表面活性剂界面性质的研究并不多， 而且工作量相对于单一表面活性剂而言相当大，所以双配方表面活性剂的玻纤开发相对较少。现有总多产品中，玻纤 系统中添加双表面活性剂的产品有 IHP-402b, 在玻纤处理液中添加有 Brij35 (S21) 和 TWEEN80 (S20), 还有 IHI-U302a ，在其玻纤中就含有 Tetronic (S9) 和 STANDAPOL ES-1 （ S7）。另外还有类特殊的产品其样品垫中不添加任何表面活性剂，如  ISY-U302b  和 IHI-402g  。 1.16D . 表面活性剂的种类筛选 关于表面活性剂种类方面，一般开发新产品的玻纤时，会首选非离子表面活性剂。非离子类表面活性高分子化合物在水溶液中不离解，此类化合物的特殊性能值得关注：不存在静电；在电解质中的特殊性能；不规律的溶解性。常见的非离子类表面活性高分子化合物有：聚乙烯醇、聚醚、纤维素衍生物、聚酯，糖基非离子类表面活性高分子化合物 也有报道。 使用频率最高的五中表面活性剂中就有 S14 （ TRITON X-100 ）、S19（ TWEEN 20）、 S20（ TWEEN80 ）和 S21(BRIJ 35) 四种为非离子表面活性剂。 何以会优选非离子表面活性剂，其中一大原因是因为产品中的抗原抗体蛋白是两性蛋白，具有亲水键和疏水键，分子一端待正电荷，一端带负电荷，容易形成水化层，易于 受离子性表面活性剂的离子键影响， 构型或构象发生改变， 导致蛋白表面的决定簇未能 暴露或其他非特异性结合位点暴露。 还有就是离子型表面活性剂与蛋白质之间能发生反 应，蛋白质在酸性或碱性介质中，可发生解离而分别带有正电荷或负电荷， 可与离子型 表面活性剂发生反应；使蛋白质变性而失去活。 阳离子和阴离子表面活性剂，不但毒性大，而且还有较强的溶血作用。吐温类的溶血作用通常比其他含聚氧乙烯基的表面活性剂小，这点非常重要，因为有许多产品是用于检测全血的。使用的表面活性剂当然最好不宜溶血。这样会导致血红细胞释放，跑板的背 景非常红，会极大的影响判读，严重的会掩盖 T 线原有颜色，直接分辨不出 T 线。 另外，两性离子表面活性剂的开发程度不如非离子表面活性剂也是一个原因。虽然研发人员发现 S9（ Tetronic ）这种两性离子表面活性剂的功能不错，但目前市面上可供选择 的两性离子表面活性剂种类不多， 该类型的表面活性剂种类和作用还有待继续研发和探索。 表面活性剂使用注意事项 在配制玻纤处理液时，由于人员会在搅拌状态下，往处理液中添加一定量的表面活性 剂，所以必须要注意尽量避免泡沫的产生或尽量减少泡沫。因为在配制过程中，小体积的配制玻纤处理液是使用磁子搅拌，大体积的配制处理液是使用搅拌浆，一般状态下为了保证处理液中各种物质溶解完全，搅拌状态较强，所以在添加表面活性剂时，难免会产生泡沫，尤其是对于那些本来就具有起跑性质的表面活性剂，泡沫产生更加明显。像 STREP A 的 Buffer 液就会有很多泡沫但是泡沫的产生会带来诸多影响。比如给后