液相液质检测前处理技术（刘永慧） 液相液质检测前处理技术（刘永慧） 液相色谱及其检测技术.ppt

SPE(固相萃取)机理 Source: / 免疫亲和柱的净化过程 优点 特异性强 可浓缩样品液 缺点 耗时 只针对单一毒素 价格昂贵 前处理技术比较 小结 SPE：较通用 LLE：水油两相 PPT：蛋白质较多的样品，医药 SPME：半挥发-挥发性样品，多与GC联用 GPC：去除大分子杂质（油脂，大分子色素） ASE：加速溶剂萃取 样品前处理技术比较 净化方法 优点 缺点 LLE（液液萃取） 无需特殊装置 1)操作繁琐，费时 2)耗费大量的有机溶剂，导致高成本和 对环境的污染 3)乳化现象，导致重现性差 PPT（沉淀法） 1）操作简单 2）可自动化适于高通量分析 1)非特异性的沉淀反应可能使微量 的分析物随着基质蛋白质共同沉淀 而损失。 2)不能去除基质中的盐分，LC/MS 分析时会导致离子干扰 SPE（固相萃取） 1) 集样品富集及净化与一身，从而 　提高检测灵敏度 2) 比液液萃取更快，方便和节省 溶 　剂，可自动化 3) 批量处理重现性好 成本较高 SPE方法的优点 萃取过程简单快速，易于多样品平行操作 易于自动化，提高分析效率 样品更干净 高样品回收率和良好的重现性 降低溶剂的消耗 以有限的预算、仪器、人力来应付更多的样品， 更复杂的样品基质和更低的检测限… 6.7 样品的采集、制备和储存 （一） 正确采样的重要性：两个原则 第一，采集的样品有代表性 第二，采样过程中要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散或带入杂质 （二）采样步骤 从大量的分析对象中抽取有代表性的一部分样品作为分析材料（分析样品），称为样品的采集。 （0.5kg） 需检验的批量 食品 原始样品 平均样品 试验样品 复验样品 保留样品 （0.5kg） （0.5kg） 混合、处理 缩分 采样 （二）采样步骤 6.7 样品的采集、制备和储存 为获得均匀的样品，必须对样品进行粉碎、混均、缩分，这项工作即为样品制备。样品的制备方法因产品的类型不同而异： 1. 液体、浆体或悬浮液体 一般将样品摇均，充分搅拌。如：酱油、牛奶、饮料、蜂蜜等。常用工具为玻璃搅拌棒、电动搅拌器。 2. 固体样品 用切细、粉碎、捣碎、研磨等方法将样品制成均匀可检状态。水分含量少、硬度较大的固体样品（如谷物）可用粉碎法；水分含量较高，质地软的样品（如水果、蔬菜）可用匀浆法；韧性较强的样品（如肉类）可用捣碎法。常用工具有粉碎机、组织捣碎机、绞肉机等。 3 . 罐头 水果罐头在捣碎前须清除果核；肉禽罐头应预先清除骨头、鱼类罐头要将调味品（葱、辣椒等）去除后再捣碎。常用的捣碎工具有高速组织捣碎机等。 （三）样品的制备 一、样品的采集、制备和储存 制备好的样品如果需要保存，应放在密闭洁净的容器内，置于干燥、通风、阴暗处保存，如谷物类。易腐烂变质的样品应保存在0～5℃冰箱内，如水果、蔬菜。禽肉类及鱼类样品须在-18℃冷冻保存，同时根据样品自身特性来规定适宜的保存期。 （四）样品的保存 6.7 样品的采集、制备和储存 一卡车玉米中有20ppb黄曲霉毒素的污染 从卡车中的取样量 由于分布不均匀 可能检测到的结果范围 4.50 kg 2.25 kg 1.00 kg 0.45 kg 11.6 - 28.4 ppb 8.1 - 31.9 ppb 3.2 - 38.8 ppb 0 - 46.9 ppb * 95% confidence range 黄曲霉毒素取样 取样与次取样 在一批样品中至少从5-10个不同地点取样 成品粗粉至少取样1公斤 整个谷物样品至少取样2.5公斤 全部样品必须碾磨并进行二次取样 萃取、纯化… 取样/二次取样 碾磨机 Romer Series II Mill Romer Analytical Sampling (RAS) Mill 7、报告及数据分析 7.1 定量结果 外标法（标准溶液的保质期） 单点定位（样品与标准溶液的浓度接近） 标准曲线（至少5个点，相关系数≥0.995） 内标法（内标的选择、性质相近、保留时间接近） 单点定位（样品与标准溶液的浓度接近） 标准曲线（至少5个点，相关系数≥0.995） 7.2 定性 保留时间定性 二极管阵列检测器，特征峰 两个色谱柱 两个检测器 7.3 异常数据原因 前处理过程：步骤、试剂、条件 标准溶液：浓度、有效期 色谱条件：流动相、流速、柱温、检测器等 仪器本身是否正常 7.4 报告内容： 检测原始记录 色谱图 样品的信息 仪器信息 检测环境信息 检测结论 … 8 液质联用技术的应用 8.1