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- 2020-11-19 发布于山东
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生物素标记抗体
生物素标记抗体
生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,生物素标记的抗体可存放多年而不失活。能与生物素结合的二级试剂为亲和素和链霉亲和素,所需的各种标记物均可购置。此外,亲和素和链霉亲和素的结合背景水平非常低.结合紧密且快速。故可消除多步骤程序中的许多缺点。生物素拯记—尥王要优点是标记一抗后,再选用亲和素或链霉亲和素标记的二级试剂进行测定。
抗体很容易与经过化学修饰的活化生物素结合。生物素又可以与结合有酶、荧光染料或放射性碘的亲和素或链霉亲和素连接,后者已有商品试剂供应。这样只需将纯化抗体与生物素结合,就可用各种不同的标记物来检测。链霉亲和素及
亲和素与生物素的亲和力非常高 (Ka1015L / mo1),并且二者
间的相互作用实质上是不可逆的。由于链霉亲和素的等电点(pI)更适宜故其更常用,背量也因此较低。
将生物素与抗体共价结合是一种非常简便和直接的标记方法。通常,生物素对抗体并无负面影响且标记条件温和,用亲和素或链霉亲和素标记试剂进行检测的敏感性与使用标
记抗 IZ 抗体相同。 Becker 和 Wichek(1972) 、Heitzmann 和 Richards(1974) 及 Heggeness和 Ash(1977) 等提供了首次使用
生物素与亲和素复合物的例证, 而且 Green(1963,1990)对两者的相互作用做了详细论述。
大多数生物素酰基
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