一种日本血吸虫病核酸诊断方法的建立.pdfVIP

摘 要 血吸虫病是由血吸虫感染引起的、危害严重的人畜共患寄生虫病，在 78 个热带和亚热带国 家或地区流行。在我国流行的是日本血吸虫病，几十年来我国血吸虫病防控取得举世瞩目的成就， 大多数地区人、畜血吸虫病的流行已呈现低流行性和低感染特点，传统的病原学诊断逐渐无法满 足现场需求。本研究的目的是建立一种敏感性高、特异性强、便于判断的日本血吸虫病核酸诊断 方法。 在前期研究及生物信息学分析的基础上，本文选择G01、F11 、E12 、H12 、G1/3、G7-1、G7-2 和G7-3 作为候选基因，分别设计引物并以日本血吸虫虫体基因组DNA 、BALB/c 小鼠基因组DNA 和新西兰大白兔基因组 DNA 为模板进行基因扩增，挑选出能特异性从日本血吸虫虫体基因组 DNA 扩增，但不能从BALB/c 小鼠和新西兰大白兔基因组DNA 扩增出目的片段的基因。以G01 作为诊断靶基因，三个不同感染剂量 （10 条、40 条、100 条）的小鼠各10 只，在感染后42d 提 取血浆提核酸为模板，均可扩增得到G01 片段。同时以弓形虫、大片形吸虫、前后盘吸虫、住肉 孢子虫、旋毛虫、棘球绦虫的虫体基因组 DNA 为模板对 G01 进行扩增，均未扩增出目的片段， 表明G