矿区复合重金属污染杨树生态区细菌多样性及重金属耐受内生菌筛选.pdfVIP

硕士学位论文 摘 要 微生物多样性在维持地球土壤生态完整性中扮演着重要角色，也是评价土壤 污染的重要指标。然而，针对矿山生态系统，特别是长期复合重金属污染矿区的 细菌群落认识还不够透彻。本研究对矿区复合重金属污染土壤修复样地进行了采 样调查，发现污染区Cd、Cu、Pb、Zn 等4 种重金属含量超过国标风险筛选值的 2-200倍，并从中选取了具有Cd、Mn、Zn 转运和富集能力的修复植物杨树及其 内生菌、土壤和根际菌作为研究对象，对其相关的微生物群落变化特征，环境因 子与微生物的相互关系，以及可培养内生菌进行了深入研究，发现了大量污染生 境的核心物种，揭示了重金属污染生态系统中细菌结构的变化规律，为进一步解 析植物、土壤等不同生境细菌群落的构成和变化，以及重金属污染修复效果评价 提供了依据。 主要研究内容和结果如下： 一、发现了受重金属复合污染的尾矿库土壤和场地修复杨树内生细菌群落 多样性结构特征。采集矿区污染和非污染区域的土壤、杨树根进行16SrDNA 高 通量测序，OTU 聚类分析共比对到了32 个门的1246个物种，48个核心物种。 多样性指数评估发现细菌群落多样性呈现根际 裸土 植物内生菌，非污染区 污 染区的规律。主成分分析群落分布受生境差异的影响显著，污染环境提高了群落 组成的差异，而植物内部生境弱化了组成差异，植物内生菌群落分布相似度较大， 污染植物内生菌与非污染对照群落分布差异不明显 多样性也最低。, 二、揭示了环境因子与菌群的相互作用。重金属是影响污染区细菌群落多样 性的关键因素。β多样性分析显示污染土样与非污染对照的群落分布差异明显， 没有植物干扰的污染裸土与其他生境土样差异最大；冗余分析也证明了重金属对 污染群落分布的影响显著且远大于土壤理化性质等其他环境因子造成的影响；环 境因子相关性分析发现重金属成为污染耐受菌群的偏好生存环境，这些菌群呈现 出与重金属的显著正相关；进一步的基因功能预测发现污染样本中与重金属离子 输送、重金属抗性和修复相关的代谢途径有关的序列较对照更为丰富。植物根际 效应、土壤理化性质也是重要的环境因子，冗余分析显示pH、总钾、有效氮、 有机质、有效钾和总有机碳对非污染细菌群落影响大于重金属；环境因子与菌种 相关性热图发现这些土壤化学性质因子成为污染敏感菌群的选择偏好。 三、分离并筛选出了一批杨树内生菌，并初步探讨了其重金属耐受机制。从 461 80 杨树根、茎样本分离得到 个菌落，对其中 个单菌落进行了重金属耐受性 II 硕士学位论文 初步筛选，获得了一批对Pb、Zn、Cd 具有耐受能力的可培养菌株。对其中2 株 重金属耐受优势菌进行了生理生化实验、菌种鉴定和耐受性能检测，命名为 Burkholderiasp.YG-3 Enterobactersp.YG-14 Cd Zn Pb 和 。两菌的 、 和 耐受浓度 -1 -1 -1 -1 -1 分别达到了1300mgL 和1000mgL ，1500mgL 和600mgL 以及2000mgL -1 2+ 和2000mgL ；在高浓度重金属溶液中，YG-3 和YG-14 对Cd 去除率分别达 62% 43% Zn2+ 81% 68% 到 和 ， 去除率达到 和 。为后续重金属耐受机理研究提供 了生物材料和基础数据。 本研究发现了受重金属复合污染的尾矿库土壤和场地修复杨树内生细菌群 落多样性结构特征，揭示了环境因子与菌群的相互作用，并