实验2 3,5-二硝基水杨酸比色法还原糖含量的测定.pptVIP

植物组织中还原糖含量的测定(3,5-二硝基水杨酸比色法) 3 实验方法 * 实验2　 实验类型：基础验证型 实验学时：3学时 实验目的 　　掌握和学习3,5-二硝基水杨酸比色法还原糖含量的测定的基本方法,分光光度计的使用、标准曲线的制作。 1 原理 3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖（各种单糖和麦芽糖）溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和棕红色物的颜色深浅呈一定比例关系。在540nm波长下测定棕红色物质的消光度值，查标准曲线，便可求出样品中还原糖的含量。 黄色 桔红色 ? ? ? ? + 糖酸 加热 碱性 2 试剂、材料与设备 2.1　主要试剂 1mg/mL葡萄糖标准液： 准确称取100mg分析纯葡萄糖（预先在80℃烘至恒重），置于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，转移到100mL的容量瓶中，以蒸馏水定容，摇匀，4℃冰箱中保存备用。 3,5-二硝基水杨酸试剂： 6.3g 3,5-二硝基水杨酸和262mL 2mol/L NaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解。冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。 2.2　材料:玉米粉 25ml刻度试管；大离心管；100mL烧杯；100mL三角瓶；100mL容量瓶 ；刻度吸管 1mL、2mL、10mL； 2.3