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中学高效课堂 高二生物选修 1 导学案
课 题 专题 2 课题 1 微生物的实验室培养 导学案
备课时间 授课时间 编号
备课教师 备课组长 课型
1.了解培养基的用途、种类及一般成分,
学习目标
2.掌握培养基制作的一般的步骤,
3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。
4.学会一般的消毒、灭毒的方法,进行无菌技术的操作。
通过本节学习,了解和掌握生物技术在日常生活中的应用,所以要
德育渗透
认真学好生物知识。
学习重点 培养基的制备、微生物的培养的操作。
学习难点 培养基的制备和微生物的分离。
课前预习,完成自主学习内容。课前阅读教材,完成自主学习部分,
学法指导
为课上合作探究作好准备。
自主学习内容
教师
活动
(一)培养基
1 .概念:人们按照微生物对
的不同需求,配制出供其
营养基质称为培养基 。可分为
培养基和
培养基。
2 .营养构成:各种培养基一般都含有水、
、
和无机盐,此
外还要满足微生物生长对
、特殊营养物质以及氧气的要求。
3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加
、培养霉菌时需将培养
基 PH 调至
、培养细菌时需将 PH 调至
、培养厌氧微
生物则需提供
条件。
(二)无菌技术
A、获得纯净培养物的关键是防止外来 的人侵,具体操作如下:
1 .对实验操作的 、操作者的 和 进行清洁和
消毒。
2 .将用于微生物培养的 、接种用具和培养基等器具进
行 。
3 .为避免周围环境中微生物的污染, 实验操作应在 附近进
行。
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。
B、消毒和灭菌
1.消毒是指使用较为 的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部
对人体有害的微生物 ( 不包括芽孢和孢子 ) 。常用的方法有 消毒法和
消毒法。
2.灭菌是指使用 的理化因素杀死物体内外 的微生物。
常用的方法有: 灭菌、
灭菌、 灭菌。
(三)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
1.计算:根据 比例,计算 100mL 培养基各成分用量。
2.称量:牛肉膏较黏稠,可用玻棒挑取,同 一同称量。称取牛肉
膏和蛋白胨时动作要迅速,目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
3.溶化:加水加热熔化牛肉膏与称量纸 →取出称量纸 →加入蛋白胨和氯
化钠继续加热 →加入 →用蒸馏水定容到 100mL(整个过程不断用玻棒
搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂) 。
4.灭菌:将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加塞包扎后用 灭
菌锅灭菌;所用培养皿用报纸包扎后用 箱灭菌。
5.倒平板:待培养基冷却至 左右时在 附近操作进行。
其过程是:
①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出棉塞;②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰;③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿
盖。
④待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。
(四)纯化大肠杆菌
微生物接种最常用的是 划线法和 涂布平板法。
1.平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续 的操作,将
聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面。
其操作步骤是:
①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。
④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙, 把接种环伸入平板内划 3~5 条平行线,盖上皿盖,不要划破培养基。
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⑦灼 接种 ,冷却后从第一区划 末端开始向第二区域内划 。重复上述 程,完成三、四、五区域内划 。注意不要将第五区的划 与第一区划 相 。
⑧将平板倒置放在培养箱中培养。
2.稀 涂布平板法 是将菌液 行一系列的梯度 ,然后将不同
稀 度的菌液分 到 脂固体培养基的表面, 行培养。
3.培养:将接种后的培养基和一个 的培养基都放入 恒温箱
中,培养 12h 和 24h 后 察并 果。
4.菌种的保存
(1) 于 繁使用的菌种,可以采用 ______保藏的方法。
① 保藏方法
将菌种接种到 管的固体 ______上,在 ______的温度下培养。当菌落
成后,将 管放入 ______的冰箱中保藏。以后每 ______个月,都要重新将菌
种从旧的培养基上 ______到新 的培养基上。
②缺点: 种方法保存的 不 ,菌种容易 ______或 生 ______。
(2) 于需要 ______保存的菌种,可以采用 ______管藏的方法。
3mL 的甘油瓶中,装入 1mL 甘油后 ______。将 1mL 培养的菌液 移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在 ______的冷 箱中保存。
合作探究
1:无菌技 除了防止培养物被
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