如何制作牛肉膏蛋白胨琼脂培养基？.doc

如何制作牛肉膏蛋白胨琼脂培养基？ 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基是一种广泛应用于培养细菌的培养基，其主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCl。其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供细菌生长所需的无机盐成分。牛肉膏蛋白胨琼脂培养基是药敏实验的基础，通过将病料接种在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中，并在特定位置贴上含有定量抗菌药物的滤纸片，纸片中的药物在琼脂中扩散，起到了一定的抑菌作用，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径受药物在琼脂中扩散速度的影响而不同。根据抑菌圈大小，即可得出最适宜的药物，起到了科学用药的结果。牛肉蛋白胨培养基配方　　牛肉膏：3.0g 蛋白胨：10.0g　　NaCl：5.0g 　琼脂：15-25g　　水：1000ml 　pH：7.4-7.6称量　　按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCl置于烧杯中。称药品时严防药品混杂，一把药匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品。溶化　　在上述烧杯中加入1000mL的蒸馏水，用玻棒搅匀。然后，在石棉网上加热使其煮沸溶解。在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。调pH　　在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7.6。反之，则用1mol/L HCl进行调节。注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。　　对于有些要求pH值较精确的微生物，其pH的调节可用酸度计进行。过滤　　趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。(一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去。)灭菌　　将过滤后的培养基置于烧杯中，用牛皮纸包好，置于高压蒸汽灭菌锅中进行高压灭菌。灭菌的温度和时间分别是：121℃高压灭菌15-30min。分装　　此步骤全部在超净工作台中完成。灭菌以后，在培养基冷却到40-50℃时，快速将液体培养基分装在90mm的一次性培养皿中，每个培养皿中大概加入10mL左右的液体培养基。将培养皿静置放置于水平台面上使其自然凝固。保存　　牛肉膏蛋白胨琼脂培养基需保存在4℃冰箱。环凯微生物科技微信号： huankai