！第15章 课件1-动物细胞培养.pdfVIP

第一节 动物细胞培养 • 概述 • 动物细胞的形态 • 动物细胞培养过程 • 动物细胞培养特性 • 动物细胞培养基的组成和制备 • 动物细胞培养方法，操作方式和条件的控制 • 动物细胞培养的方向 • 动物细胞培养技术的应用 1 一、 概 述 1. 动物细胞培养的起源 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质 外突形成，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成。 1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索 中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。 蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神 经纤维。 哈里森的实验解决了神经纤维的起源问题，开创了动物 组织培养的先河。此后，动物组织培养不断改进并逐渐发展 成为动物细胞培养。 2 2.动物细胞培养 就是从动物有机 体中取出相关的组 织，将它分散成单 用培养的人细胞构建人造皮肤 个细胞，然后，放 在适宜的培养基中， 让这些细胞生长和 增殖. 3 二、体外培养 动物细胞的形态 （一）贴壁型 成纤维细胞型 上皮型细胞 游走细胞型 多形型细胞 （二）悬浮型 （一）贴壁型： 大多数培养细胞属于贴壁依赖性细胞 贴附:是大多数有机体细胞在体内生存和生长发育的基本 存在方式 结果: 基于贴附特性，使细胞与细胞之间相互结合形成组 织，有机体的绝大多数细胞必须贴附于一固相表面才能生 存和生长。 培养时：这些细胞被放到体外环境中以后,同样需要贴附 于某一固相表面才能生存和生长 贴附(锚定或锚着)依赖型细胞：唯有贴附于固相表面才能 生存的细胞 细胞在体内、外的贴附方式：存在差异 体内：贴附是全方位,外形具有复杂的立体特征 体外：多数情况，细胞只有一个附着平面，外形一 般与体内时明显不同 贴附的固相表面：玻璃、聚苯乙烯塑料 1、成纤维细胞型： 1、成纤维细胞型： 名称：凡在培养中形态与成纤维细胞类似的 来源：由中胚层间充质组织起源的组织如： 真正的成纤维细胞：心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮 形态：似体内成纤维细胞的形态，胞体梭形或不规则三角形， 胞质向外伸出2—3个长短不等的突起，中有卵圆形核 生长特点：排列成放射状，漩涡状，并不紧靠连成片，细胞- 细胞接触易断开而单独行动，游离的单独的成纤维样细胞， 常有几个伸长的细胞突起 2、上皮型细胞： 2、上皮型细胞： 来源：来源于外胚层、内胚层细胞, 如：皮肤及其衍 生物,消化道，乳腺，肺泡, 上皮性肿瘤 形态：类似体内的上皮细胞，扁平，不规则多角形， 中有圆形核 生长特点：易相连成片，相靠—紧密相连—成薄层— 铺石状生长时呈膜状移动，很少脱离细胞群而单个 活动 3、游走细胞型： 呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起， 呈活跃游走或变形运动，方向不规则。 此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区别。 4、多形型细胞： 有一些细胞，如神经细胞难以 确定其规律和稳定的形态，可统归 于此类。 （二）悬浮型： （二）悬浮型： 见于少数特殊的细胞，如某些类型的癌细胞及白血病细胞。 胞体圆形，不贴于支持物上，呈悬浮生长。这类细胞容易 大量繁殖。 概念：培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长 或以机械方法使保持悬浮状态下生长 来源：自血，脾或骨髓，血中白细胞癌肿细胞 特点：在悬浮中生长良好细胞圆形，单个或小细胞团 生存空间大，提供数量大，传代方便(不需消化)， 易于收获，可获得稳定状态 三、动物细胞培养过程： 动物胚胎或