！第15章 课件2-植物细胞培养.pdfVIP

第二节 植物细胞培养 植物细胞培养（plant cell culture）是指 在离体条件下对植物单个细胞或小的细胞团进行 培养使其增殖的技术。 相关概念 植物细胞的全能性 即单一的离体细胞在一定的环境条件下能 分化成不同细胞组织乃至整个植株的能力。 细胞分化 是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或 潜在发育方式改变的过程。 细胞分化也可以说是相同基因型的细胞所具有 的各个不同的表现型。 脱分化 植株上已经分化的细胞或组织离体后在培养条 件下逐渐恢复到分生状态的过程。 细胞脱分化的结果通常是形成愈伤组织 （未 分化的细胞团）。 愈伤组织 原指植物体受伤时产生于 伤口周围的组织。现多指切 取植物体的一部分，置于含 有生长素和细胞分裂素的培 养液中培养，诱导产生的无 定形的组织团块。 外植体 愈伤组织例图 把由活植物体上切取下来 以进行培养的那部分组织或 器官叫做外植体 植物细胞培养 1. 单细胞分离 2. 悬浮培养 3. 单细胞培养技术 4. 细胞大规模培养与次级代谢产物生产 5. 植物细胞培养的应用举例 1. 单细胞分离 ①由完整的植物器官分离单细胞 ②由愈伤组织中分离单细胞 叶片是分离单细胞的最好材料 ①由完整的植物器官分离单细胞 机械法 ①用刀片刮叶片 撕去下表皮 露出叶肉细胞 用解剖刀刮下细胞 机械法 ②叶片研碎、离心 加研磨介质 研碎匀浆 只有薄壁组织排列松 散，细胞间接触点很 过滤、离心 少时用机械法分离叶 肉细胞才能取得成功。 酶解法 Takebe等（1968）最早报道：用果胶酶处理 可以分离大量的叶肉细胞 加果胶酶 过滤、离心 ②由愈伤组织中分离单细胞 (1) 诱导产生愈伤组织； (2) 愈伤组织反复继代，使组织不断增殖，提高 愈伤组织的松散性； 茎段 步骤： (3) 将愈伤组织在液体培养基中培养，建立悬浮培养物 摇床用于振荡 15ml medium/1g 继代 悬浮 transfer 1 time/3d 30~150 rpm 3 weeks