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与通风、搅拌的剧烈程度有关 与培养基所用原材料的性质有关 与培养基的配比、浓度和粘度有关 培养基灭菌的方法和操作 与发酵过程中培养液的性质及微生物的 代谢有关 罐内机械消泡 罐外机械消泡 机械消泡装置必须满足的条件 ①动力小; ②结构简单; ③易清洁; ④运行可靠; ⑤维护费用低; 常用的消泡剂 1)天然油脂类 豆油、玉米油、棉籽油、菜籽油和猪油等。 油不仅用作消泡剂,还可作为碳源和发酵控制的手段。 在发酵中,要控制油的质量、新鲜程度,并要进行发酵试验检验。 2)聚醚类 聚醚类消泡剂品种很多,它们是氧化丙烯或氧化丙烯和环氧乙烷与甘油聚合而成的聚合物。如聚氧丙稀甘油(GP型)和聚氧乙烯氧丙稀甘油(GPE型,泡敌),消泡能力相当于豆油的10~80倍 3)脂肪酸和酯类 4)硅酮类 以天然油脂类和聚醚类在生物发酵中最为常用。 应用消泡剂时的增效方法: 1)载体增效 即用惰性载体(如矿物油、植物油等)使消泡剂溶解分散,达到增效的目的; 2)消泡剂并用增效 取各种消泡剂的优点进行互补,达到增效; 例如:GP和GPE 1:1混合使用于土霉素发酵,结果比单独使用GP的效力提高2倍。 3)乳化剂消泡剂并用增效 用乳化剂(或分散剂)将消泡剂制成乳剂,以提高分散能力,增强消泡效力,一般只适用于亲水性差的消泡剂。 例如:用吐温80作为乳化剂与GP时,用于庆大霉素发酵,效力提高1-2倍。 补料的原则:控制微生物的中间代谢,使之向着有利于产物积累的方向发展 鉴于我们对微生物的代谢规律尚未充分掌握,现有的各种补料措施都是通过实验方法确定的。 62小时 20小时 45小时 6.4 补糖的控制 补糖的时机 补糖的时机不能单纯以培养时间作为依据 还要根据基础培养基中的碳源种类、用量和消耗速度、前期发酵条件、菌种特性和种子质量等因素判断。 因此,根据代谢变化如残糖含量、pH值或菌丝形态来考虑,比较切合实际。 一般都以间歇定时加入为主,但近年来也开始注意用定时连续滴加的方式补进所需要的养料。 补糖的方式 比较:连续滴加 比 分批加入 控制效果更好 一次大量加入对菌体来说需要一个适应的过程,这种突然改变有时还可能导致合成方向的改变;而连续滴加能避免菌体的代谢受到环境突然改变的影响,更有利于发酵的平稳进行。 通氨时要掌握细流,注意泡沫情况。为了避免一次加入过多,造成局部过碱,也有把氨水管道接到空气分管内,藉气流带入,可迅速与培养液混合均匀。 通氨是某些发酵生产外补料工艺中的有效措施 主要起着补充菌体的无机氮源和调节pH值作用。 6.5 补充氮源及无机盐 有些工厂根据发酵代谢的具体情况,中间添加某些具有调节生长代谢作用的物料,如磷酸盐、尿素、硝酸盐、NaSO4、酵母粉或玉米浆等。 总之,补料工艺是控制中间代谢的较为灵活的措施。不同微生物的品种或者同一个品种而菌种或培养条件不同,控制方法也略有差异,不能照搬套用,需要根据具体情况,通过实践确定最适的控制方法。 在补料中应注意以下几个问题 1)料液配比要适合,过浓会影响到消毒及料液的输送,过稀则料液体积增大,而带来一系列问题如发酵单位稀释、液面上升、加油量增加等; 2)由于经常性添加物料,应注意加强无菌控制,对设备和操作都须从严掌握; 3)此外应考虑经济核算,节约粮食,注意培养基的碳氮平衡等。 * * * * * * 日本高野信之提出: 把高级醇或植物油洒在泡沫上,当其附着到泡沫上,即溶入泡沫液,会显著降低该处的表面张力。 因为这些物质一般对水的溶解度较小,表面张力降低只限于局部,而泡沫周围的表面张力几乎没有发生变化。表面张力降低的部分,被强烈地向四周牵引、延展,最后破裂。 (1)使泡沫液局部表面张力降低导致泡沫破灭 希勒(Shearer,L.T)和艾克斯(Akers,W.W.)在油体系中研究聚硅氧烷油的消泡过程。他们对泡沫体系以1/1000秒的速度连续拍照,照片放大100倍 由图可以看出,硅油微粒到达泡沫表面使泡沫破灭,气泡合并,气液迅速分离。 1 2 3 4 当泡膜表面因存在极性的表面活性物质而具有一定的弹性(机械强度)时,这种泡膜在受到外部压力时有自愈作用。 是因为表面活性剂定向排列形成双电层,借助排斥作用阻碍泡沫合并而使泡沫稳定。 这种性质的泡沫,只需向体系中加入一种离子电荷相反的表面活性剂,就可降低泡沫稳定性。 这是因为两种表面活性剂彼此干扰,妨碍在气液界面上定向排列,破坏了膜弹性,因而产生消泡作用。 (2)破坏膜弹性导致
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