生物化学检验 体液蛋白质 06 第六章 临床基因扩增检验技术.pptxVIP

临床基因扩增检验技术;;CONTENTS;01;聚合酶链反应于二十世纪80年代由K.Mullis建立，并和定点突变的发明者M.Smith一起荣获1993年度诺贝尔化学奖，为生命科学领域的研究开创了崭新时代。;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;酶切分析 根据PCR产物中限制性内切酶的位点，用相应的酶切、电泳分离后，获得符合理论的片段。;Southern印记杂交 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链，标记后做探针，与PCR产物杂交；鉴定特异性。;;;;;;02;;;;;;;;实时荧光定量PCR三个关键词;;;;扩增曲线图;;;;如何对起始模板定量;;;;;;;如何根据扩增曲线来进行起始模板的定量分析？;;;为什么要用Ct值定量？;;;;荧光探针技术（荧光素标记探针） 探针的5′端和3′端分别标记荧光报告基团R和荧光淬灭基团Q。 探针完整时R基团与Q基团分别位于探针的二端，Q基团抑制R基团使其不能发射荧光。 ;;;; SYBR荧光染料 PCR反应体系中加入SYBR Green I染料，能选择性地掺入至双链DNA分子中，并且产生强烈荧光。 PCR过程中，SYBR Green I染料结合到新合成的双链DNA分子中，结合的荧光信号和DNA含量成正比。 ;;03;;病原体含量与病情之间的关系 病原体含量与用药之间的关系 药物及疗法的研究与开发 新的病原体分子诊