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第一节 药敏试验常用方法 01 Kirby-Bauer法（K-B纸片琼脂扩散法）和 直接纸片药敏法 纸片扩散法 02 琼脂稀释法和肉汤稀释法。 稀释法 03 抗生素浓度梯度法-E 试 验（E-test） 抗生素浓度梯度法 最新.课件 * 为了解致病菌对哪种抗菌素敏感，以合理用药，减少盲目性，往往应进行药物敏感试验。其大致方法是：从病人的感染部位采取含致病菌的标本，接种在适当的培养基上，于一定条件下培养；同时将分别沾有一定量各种抗生素的纸片贴在培养基表面（或用不锈钢圈，内放定量抗生素溶液），培养一定时间后观察结果。由于致病菌对各种抗生素的敏感程度不同，在药物纸片周围便出现不同大小的抑制病菌生长而形成的“空圈”，称为抑菌圈。抑菌圈大小与致病菌对各种抗生素的敏感程度成正比关系。于是可以根据试验结果有针对性地选用抗生素。 YAO MIN SHI YAN DA ZHI FANG FA 第二节 药敏试验大致方法 最新.课件 * 试验原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分，溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系，即抑菌圈愈大，MIC值愈小 一、纸片扩散法 最新.课件 * 判定标准 一、药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。 表一 药敏试验判定标准 具体对于不同的菌株，及不同的抗生素纸片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。 二、药物敏感实验判定标准参考表1，多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。 抑菌圈直径（毫米） 敏感度 20以上 极敏 15~20 高敏 10~14 中敏 10以下 低敏 0 不敏 最新.课件 * 试验原理 将药物混匀于琼脂培养基中，配制含不同浓度药物平板，使用多头接种器接种细菌，经孵育后观察细菌生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含药物浓度测得MIC。 MIC：稀释法所测得的某抗菌药物能抑制被检菌肉眼可见生长的最低浓度 二、稀释法 最新.课件 * 试验原理 E试条是一条 5mm×50mm的无孔试剂载体，一面固定有预先制备的，浓度呈连续指数增长稀释抗生素，另一面有读数和判别的刻度。将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上，经孵育过夜，围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈，圈的边缘与试条交点的刻度浓度即为抗生素抑制细菌的最低浓度。 三、抗生素浓度梯度法-E 试 验 最新.课件 * 结果判断和报告 读取椭圆形抑菌 圈与E试验试条 的交界点值，即 为MIC值 最新.课件 * 三种方法的比较 纸片扩散法 稀释法 E-Test 优点 缺点 操作简单，重复性好； 成本较低；无需特殊设备； 灵活选择抗菌药物； 结果容易理解 标准化方法，结果可靠； 检测菌的范围更广； 定量检测； 更好地反映菌株耐药程度 操作简单； 定量检测 不适用于生长较慢 或生长速率不同的菌株 以及某些苛养菌 操作费时费力 成本太高，常规试验很难应用； 局限性，主要用于苛养菌或厌氧菌 最新.课件 * 对任何分离的可疑病原菌，若不能从该 菌的种属特征可靠地推知其对抗菌药物的敏感性，就需要进行药敏试验。 以下情况不必进行药敏试验： 正常定植菌与感染的关系不明确时； 污染菌； 已知细菌对某种抗生素天然耐药； 已知细菌对某种抗生素全部敏感。 第二节 哪些细菌需要做药敏试验？ 最新.课件 * 一般细菌培养 幽门螺旋杆菌 血培养 痰培养 其他 第三节 安康检验微生物检测 目前我中心开展的微生物检测主项目众多，比较常见的有血培养（需氧、厌氧）、幽门螺旋杆菌培养、骨髓培养、中段尿+菌落计数、大便常规培养、霍乱弧菌培养、咽拭子、痰培养、脑脊液培养、穿刺液培养、胸腹水培养、浓汁及创伤、眼耳分泌物、前列腺液培养、念珠菌培养、一般细菌培养、肥达氏反应、外斐氏反应等数十种。 药敏 最新.课件 * 小结 药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株。在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因为我们药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给患者用药的时候，必须通过机体的吸收才能