细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术[宣讲].pptVIP

实验程序1（细菌的纯种分离——稀释平板法） 1. 取样。 2. 将1瓶90mL和5管9mL无菌水排列好，用记号笔依次编上10－1、 10－2、10－3、10－4、10－5、10－6。在无菌操作条件下，用10mL的无菌移液管吸取10mL水样(或其它样品)加入编号为10－1无菌水(内含玻璃珠)中，将移液管吹洗三次，用手摇10min将颗粒状样品打散。即为10－1浓度的菌液。用1mL无菌移液管吸取1mL 10－1浓度的菌液于编号为10－2无菌水中，将移液管吹洗三次，摇匀即为10－2浓度菌液。同样方法，依次稀释到10－6 。 * 精品PPT | 借鉴参考 实验程序1（细菌的纯种分离——稀释平板法） 稀释液的制备 * 精品PPT | 借鉴参考 实验程序1（细菌的纯种分离——稀释平板法） 3. 平板的制作 ① 取10套无菌培养皿编号， 10－4、10－5、10－6各3个，另一个为空气对照。 ② 取1支1mL无菌移液管从浓度小的菌液开始，以10－6、10－5、10－4为序分别吸取0.5mL菌液于相应编号的培养皿内(每次吸取前，用移液管在菌液中吹泡使菌液充分混匀)。 * 精品PPT | 借鉴参考 实验程序1（细菌的纯种分离——稀释平板法） 3. 平板的制作 ③ 加热培养基，当其冷至45℃左右时，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拿培养皿，以中指、无名指和小指托住皿底，拇指和食指夹住皿盖，靠近火焰，将皿盖掀开，倒入培养基后将培养皿平放在桌上，顺时针和逆时针来回转动培养皿，使培养基和菌液充分混匀，冷凝后即成平板，倒置于30℃培养24～48h，然后观察结果。 * 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 * 精品PPT | 借鉴参考 精品PPT | 借鉴参考 实 验 二 细菌培养基的配制、灭菌及接种、培养技术 * 精品PPT | 借鉴参考 第一部分细菌培养基的制备、灭菌 目的要求 实验材料 实验程序 * 精品PPT | 借鉴参考 目 的 要 求 熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。 * 精品PPT | 借鉴参考 实 验 材 料 药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。 高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻璃珠等。 * 精品PPT | 借鉴参考 实 验 程 序 玻璃器皿的洗涤和包装 培养基的制备 无菌稀释水的制备 培养基和玻璃器材等的灭菌 * 精品PPT | 借鉴参考 实验程序1 （玻璃器皿的洗涤和包装） 清洗并烘干玻璃器皿：如培养皿、移液管、试管等。 棉塞的制作 包装培养皿和移液管等。 * 精品PPT | 借鉴参考 实 验 程 序2 （培养基的种类） 据组成成分可分为: 1.合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。 2.半合成培养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。 3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。 从培养基的物理状态可分为 1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。 2.固体培养基：在液体培养基中加入15～30g/L左右的琼脂。 3.半固体培养基：在液体培养基中加入3～5g/L左右的琼脂。 * 精品PPT | 借鉴参考 实 验 程 序2 （培养基的种类） 常用凝固剂为琼脂（其次为明胶），又叫洋菜、冻粉。 * 精品PPT | 借鉴参考 实 验 程 序2（培养基的配制