培养基使用标准.docx

Xx公司 作业指导书 编号：xxx/xx-xx-20xx 培养基使用规程 版本/修改次：1/0 第1页 共2页 目的 规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理。 适用范围 本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。 职责 3.1检验人员：按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。 3.2科室负责人：负责指导、监督检验人员规范使用培养基。 使用程序 4.1培养基的储存 4.1.1除特殊说明和标准规定，通常情况下基础培养基（如营养琼脂培养基）应在 4°C 冰箱中保存不超过3个月，或在室温（20 C）下保存不超过一个月[1]。 4.1.2灭菌后的培养基应置适当条件下保存至规定的有效期，并对保存条件进行确证 详见表1。 表1 培 养基 2?8 C条件保存期限[2][3] 培养基种类 保存条件 保存时间 VT7 壬匕 -f=n 不密封 2周 T板培养基 密圭寸 6?8周 试管培养基 不密封 2?4周 （棉塞） 密圭寸 8?10周 试管培养基 不密封 8周 （软木塞或腊封） 密圭寸 16?18周 4.2琼脂培养基的融化 4.2.1将培养基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法 （如高压锅中的蒸汽，如105 C） 使之融化。经过高压的培养基应尽量减少重加热时间，避免过度加热。 4.2.2培养基融化后放入47 C±2C的恒温水浴锅或恒温培养箱中保温，直至使用。 4.2.3融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不应超过 4h，不可二次融化。 4.3培养基的脱气 必要时，将培养基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加热 15min，加热时松开容器的盖 子；加热后盖紧，并迅速冷却至使用温度。 4.4添加成分的加入 ——对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至—47 C±2 C时再加入。灭菌的添加成分在加入 Xx公司 作业指导书 编号：xx/xx-xx-20xx 培养基使用规程 版本/修改次：1/0 第2页 共2页 期等内容。 4.5.4对于采用表面接种形式培养的固体培养基。应先对琼脂表面进行干燥：揭开平皿 盖，将平板倒扣于烘箱/培养箱中（温度设为25C?50C）；或放在有对流风的无菌净化台 中，直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商业化的平板琼脂培养基应按 照厂商提供的说明使用。 4.6培养 4.6.1培养时每垛最多堆放六个平板，平板间要留有空隙以保证空气流通，使培养物的 温度尽快与培养箱温度达到一致。 4.6.2在培养过程中，培养基会损失水分。当水分损失的里大于培养基总里的 15%时， 就会影响微生物的生长。造成培养基水分损失的因素较多，如培养基成分，平皿中培养基 总量和培养箱的类型等（如使用带风扇的培养箱，培养箱中的湿度偏低，平板在培养箱中 位置靠近培养箱内壁等），操作时应注意避免。 4.7培养基的弃置 培养基废弃前，实验室米用12「C、15分钟蒸汽灭菌，或煮沸消毒30分钟。 5.参考文献 5.1 SN/T1538.1-2005.培养基制备指南 第一部分：实验室培养基制备质量保证通则 [S]. 5.2王宏明.微生物检验技术操作规程与质量控制及检测数据分析处理实用手册 [M].北 京：卫生科技出版社，2007 . 5. 5.3汪穗福.微生物检测验证技术[M].北京：中国医药科技出版社，2005.5 . 更改 编制 审核 批准  日期 日期 日期 日期