酶制剂生产技术 酶的发酵动力学 2.4.1酶的发酵动力学.pptVIP

酶制剂生产技术模块二 酶的发酵生产 生物化工学院 兰欣 引 入 同学们, 上节课我们学习了发酵工艺流程中最为基本的消毒灭菌与无菌操作（回顾）。接下来介绍发酵过程中的调控。 学习情境七 发酵过程的调控 工作任务 （一）酶的发酵动力学 工作任务 （二）pH﹑温度与通气等因素的调控 大型空气压缩机 180M3发酵罐车间 发酵控制 生产车间计算机控制室 杯式补料系统 工作任务 （一）酶的发酵动力学  研究对象：菌体生长、基质消耗、产物生成三者间的动态平衡及内在规律。 研究目的：为最佳发酵条件控制提供依据。 同步合成型（生长偶联型），其生物合成伴随着细胞的生长而开始；在细胞进入旺盛生长期时，酶大量生成，生长进入平衡期时，酶合成停止 延续合成型：细胞生长进入平衡期后酶可延续合成 中期合成型：细胞生长一段时间后合成，进入平衡期后终止 滞后合成型：细胞生长一段时间或进入平衡期后大量生成并大量积累 在酶的工业生产中，为了提高酶产率和缩短发酵周期,最理想的酶合成模式是延续合成型； 对于其它类型的酶,要在菌种选育和工艺条件上加以调节； 对于同步合成型，尽量提高mRNA的稳定性，如降低发酵温度; 对于滞后合成型,尽量减少阻遏物； 对于中期合成型，要从提高mRNA稳定性和解除阻遏两方面进行。 （一）、微生物群体生长的规律 任何生物都有出生、发育、繁殖、衰老和死亡的过程。微生物也不例外。 研究微生物的生长规律通常以什么为研究对象？ 以个体为研究对象来研究微生物，会有什么难度？ 生长不明显 持续时间短 生长和繁殖交替进行，界限难以划清 细菌种类 培养基 培养温度 （℃） 代时（分） 大肠杆菌 牛奶 37 12.5 蜡样芽孢杆菌 肉汤 30 18 枯草芽孢杆菌 肉汤 25 26-32 乳酸链球菌 牛奶 37 26 金黄色葡萄球菌 肉汤 37 27-30 褐球固氮菌 葡萄糖 25 240 漂游假单胞杆菌 合成培养基 27 9.8 研究步骤：人工培养—定期取样—测定生长 研 究 方 法 以细菌为例 将少量同种细菌接种到液体培养基中 容积恒定 定期检测培养基中细菌群体的生长情况 于适宜条件下培养 如何测定？ 以群体为 研究单位 微生物群体数量的测定方法 测数目 测重量 例 待测样品1ml,稀释100倍后,取1ml稀释液与1ml含有红细胞1000个的液体混合均匀,显微镜下随机选若干个视野计数,得出细菌个数与红细胞个数比为5:1,则待测样品中含细菌多少个？ 称干重：一般干重为湿重的10～20%。将待测培养液放入离心管中，清水离心洗涤1～5次后，干燥处理，然后称干重。一个细胞（细菌）一般重约10－12～10－13g。 5×105个 细菌的生长曲线 1.调整期 2.对数期 3.稳定期 4.衰亡期 生长特点 成因 菌体特征 应用及其它 调整期 对数期 稳定期 衰亡期 不立即繁殖 繁殖速度 最快 出生率等于死亡率,活菌数最大,代谢产物大量积累 死亡超过 繁殖 适应新环境 条件适宜 生存条件 开始恶化 生存条件 极度恶化 代谢活跃,体积增长较快 个体形态和 生理特性稳定 有些种类 出现芽孢 出现畸变 与菌种和培养条件有关 生产用菌种 科研材料 改善和控制条件,延长稳定期 细胞裂解 释放产物 细菌群体生长的四个时期 微生物生长曲线的实践意义 处于对数期的细菌，生长繁殖速率快，代谢旺盛 进入稳定期后，抗生素等代谢产物逐渐增多 生产上常用这个时期的细菌作为菌种，以缩短生产周期。 如果适当补充营养物质，就有助于延长稳定期、提高代谢产物的产量 微生物连续培养装置 课堂总结 酶的发酵动力学 * * * * * *