药品微生物检验特点及过程控制[宣讲].pptVIP

二、检验程序 环境保证 培养基保证 无菌性检查 灵敏度检查 有效的方法 方法验证 SOP操作 有效的结果 可靠的结论 结果判断 * 精品PPT | 借鉴参考 二、检验程序 接受任务 实验方案 实验准备 样品核对 实验操作 过程监控 培养观察 有效的结果 物 质 保 障 * 精品PPT | 借鉴参考 实验室管理规范（软件） 中检所抗生素室微生物实验室质量管理体系 编写说明及批准页 1 实验室概况 1.1 实验室简介 1.2 实验室通讯资料 1.3 实验室认可项目/参数表 1.4 实验室平面图及功能区域 1.5 仪器设备总览 1.6 常备试剂耗材一览表 1.7 实验室发展目标 2 管理规范 2.1 安全管理 2.2 业务流程 2.3 人员管理（6个SOP） 2.4 样品管理（3个SOP） 3 标准操作规程 3.1 检验工作SOP（13个） 3.2 仪器操作SOP（30个） 3.3 实验记录SOP（9个） 4 实验室保障 4.1 实验室设施、设备及消耗品供应商确定原则 4.2 实验室设施服务商 4.3 实验设备供应商 4.4 实验室消耗品供应商 * 精品PPT | 借鉴参考 （一）、实验准备 实验准备应坚持“平战结合”，物质准备有备无患，应随时保证“来之能战” 。 尤其注意常备有效期要求的物品：培养基、冲洗液、滤器、小型实验器材等。 * 精品PPT | 借鉴参考 实验准备——无菌室专用酒精棉球制备实验准备——场地清洁实验准备——台面清洁 * 精品PPT | 借鉴参考 （二）、样品核对 尽快取得样品，确保样品传递过程中的完整性、安全性、有效性； 仔细核对样品及样品资料，高度关注媒体公布样品（问题样品），同时尽量获取非问题样品及同类样品，进行比较实验、比较分析； 样品外观检查、完整性检查。 * 精品PPT | 借鉴参考 样品外观检查——欣弗样品外观检查——刺五加样品外观检查——双黄连样品完整性真空检漏 * 精品PPT | 借鉴参考 （三）、实验操作 不断完善标准化操作规程（SOP），严格避免实验室污染。 实验人员 培养基 实验器材 实验环境 检验结果 待检样品 原料 辅料 设备 环境 药品（食品） 人员 药品食品生产过程中可能污染微生物的主要环节 药品食品微生物检查过程中可能污染微生物的主要环节 * 精品PPT | 借鉴参考 实验操作——物料进场 消毒液搽拭物品外表面 洁净传递（风淋、紫外照射） 双层无菌包装 核心区 外围 实验操作——人员进场 一更 二更 核心操作区 实验操作——无菌操作技术 * 精品PPT | 借鉴参考 （四）、实验过程监控 样品监控 手指监控 沉降菌监控 无菌检验框架示意图 * 精品PPT | 借鉴参考 三、结果判断 长菌与否 分离鉴定 溯源调查 结果报告 可靠的结论 有效的结果 物 质 保 障 * 精品PPT | 借鉴参考 三、结果判断 是不是微生物？ 是什么微生物？ 微生物来自哪里？ 几点思考 参见：《FTIR法用于药品检出菌与药品微生物检验洁净室环境菌的相似性考 察》《药学学报》，2007，42（11）：1189～1194 《判断无菌检查阳性结果有效性的实验探讨》《药物分析杂志》， 2008， 28（05）：66～71 * 精品PPT | 借鉴参考 1、长菌与否？ 浑不浑浊? 物理变化、化学变化还是生物变化？ 一靠经验 二靠实验 三靠严格程序控制避免干扰 * 精品PPT | 借鉴参考 是不是微生物？ （1）、液体培养基浑浊 物理变化？化学变化？生物学变化？ （2）、平板上的菌落 琼脂表面、琼脂中、琼脂和平皿夹层 菌落or药渣？ * 精品PPT | 借鉴参考 菌落or药渣？ 经60Coγ射线大剂量照射再检验 延长培养时间到7天 重新划线培养 镜检 * 精品PPT | 借鉴参考 2、分离鉴定 （1）立即转接2ml该培养物至相同的培养基中继续培养； （2）取5支冻存管，每管分装1ml浑浊培养物，-80℃保存； （3）取浑浊培养物在TSA平板/血琼脂上划线，分离污染微生物； （4）如果发现硫乙醇酸盐流体培养管变浑浊，还应增加血平板划线，并在厌氧条件下培养分离厌氧菌。由平板分离到的菌落应进一步鉴定，并逐一保藏。 * 精品PPT | 借鉴参考 是什么微生物？ 宏观：生长形态 微观：镜检 鉴定：生化鉴定（API、BD） 核酸鉴定（16sRNA、DNA） …… * 精品PPT | 借鉴参考 3、溯源调查 样品阳性培养物分离菌株 检验过程监控菌株 环境菌（近期、远期） 现场调查收集菌株 鉴定与相似性分