生物制药与药品检验技术 寻找最适合的“水晶鞋”--蛋白质混合物的分离纯化方法3 课件:蛋白质混合物分离纯化的方法(其它依据).pptx

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;项目二 多肽类药物的 原料制备与质量检验;蛋白质混合物的分离纯化方法 (其它依据) ;学习内容: (1)以电荷不同为依据 (2)以配基特异性为依据 (3)蛋白质的选择吸附分离 学习重点: (1)电泳法 (2)离子交换层析法;1. 电泳法 (electrophoresis ): 蛋白质分离、分析常用方法 原理: 不同的蛋白质因所带电荷种类、多少及分子大小不同,导致电泳速度的差异,从而得以分离 ;分类: 醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、免疫电泳 ;2. 离子交换层析法: 原理: 蛋白质是两性电解质,在pH不等于等电点的条件下带电荷,溶液中的蛋白质离子结合到离子交换树脂上去,将树脂上的离子替换下来(正—阳;负—阴)。 ;分类: 离子交换纤维素 离子交换凝胶(具有离子交换和分子筛两种作用) 大孔型离子交换树脂;亲和层析法 ;配基(层析柱填料):指能被生物大分子识别,并与之结合的原子、原子团和分子,例如酶的作用底物,抗原与抗体护卫配基等;应用: 原则上,任何一种蛋白质都能用亲和层析法分离。 已经在酶(enzyme)、抗体(antibody)、运输蛋白、完整的细胞器和病毒诱导的肿瘤细胞等蛋白质的分离中得到运用;三、蛋白质的选择吸附分离;总结:蛋白质混合物的分离纯化方法 (其它依据)

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