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;项目二 多肽类药物的原料制备与质量检验;蛋白质混合物的分离纯化方法
(其它依据)
;学习内容:
(1)以电荷不同为依据
(2)以配基特异性为依据
(3)蛋白质的选择吸附分离
学习重点:
(1)电泳法
(2)离子交换层析法;1. 电泳法 (electrophoresis ):
蛋白质分离、分析常用方法
原理:
不同的蛋白质因所带电荷种类、多少及分子大小不同,导致电泳速度的差异,从而得以分离
;分类:
醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、免疫电泳
;2. 离子交换层析法:
原理:
蛋白质是两性电解质,在pH不等于等电点的条件下带电荷,溶液中的蛋白质离子结合到离子交换树脂上去,将树脂上的离子替换下来(正—阳;负—阴)。
;分类:
离子交换纤维素
离子交换凝胶(具有离子交换和分子筛两种作用)
大孔型离子交换树脂;亲和层析法
;配基(层析柱填料):指能被生物大分子识别,并与之结合的原子、原子团和分子,例如酶的作用底物,抗原与抗体护卫配基等;应用:
原则上,任何一种蛋白质都能用亲和层析法分离。
已经在酶(enzyme)、抗体(antibody)、运输蛋白、完整的细胞器和病毒诱导的肿瘤细胞等蛋白质的分离中得到运用;三、蛋白质的选择吸附分离;总结:蛋白质混合物的分离纯化方法(其它依据)
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