生物化学：第二章 核酸.docVIP

第二章 核酸 （一）概述 1.核酸定义: 以核苷酸为基本结构单位，按照一定的顺序排列， 以3’,5-磷酸二酯键相连，折叠、弯曲形成的具有一定生物学功能的长链，具有贮存、传递遗传信息作用的遗传大分子。其中P的含量在核酸中相对恒定。在DNA中为9.9%，在RNA中为9.4% 。这可用于测定核酸的含量—— 2. N-C糖苷键：戊糖第1位碳原子上的羟基与嘌呤的第9位氮原子或与嘧啶的第1位氮原子形成的β型N-C糖苷键。 （二）核酸的分子结构 ⅠDNA的分子结构 1．DNA的一级结构：DNA分子中四种脱氧核苷酸之间通过3’,5’-磷酸二酯键连接起来的多核苷酸链的排列顺序。B-DNA：右手螺旋，螺距3.4nm，每转碱基对数目（bp数）10 2.DNA一级结构特点：DNA分子中，脱氧核苷酸之间只能以3’,5’-磷酸二酯键相连 ; DNA分子没有侧链，只能线状或环状; 具有方向性,两个末端分别为5端和3端; 生物遗传信息贮存在DNA的核苷酸序列中,真正代表DNA生物学意义的是作为可变成分的碱基排列顺序。 3. DNA的二级结构是指DNA的双螺旋结构。双螺旋结构是指DNA的两条链围着同一中心轴旋绕而成的一种空间结构。 4.Chargaff定则：(DNA的碱基组成分析即碱基成对)所有DNA分子中A=T，G=C；同一物种的所有体细胞DNA的碱基组成相同，此碱基组成可作为该物种的特征;；亲缘越近的生物，其DNA的碱基组成越近，即不对称比率(A+T/G+C)越相近。 5.双螺旋结构模型的基本特征： a.反向平行互补配对的两条链沿中心轴盘绕成右手螺旋 ； b.磷酸与脱氧核糖相互间隔连接构成的主链处于螺旋外侧，糖环平面与纵轴平行，碱基则伸向螺旋内部，碱基配对形成碱基平面，碱基平面与纵轴垂直； c.双螺旋内部的碱基按规则配对：A与T配对，形成2个氢键；G与C配对，形成3个氢键，称为碱基互补配对; d.双螺旋的两条链也呈互补关系； e.双螺旋表面形成两种凹槽：较浅的叫小沟，另一条叫大沟；双螺旋直径为2nm，每对脱氧核苷酸残基沿纵轴旋转36°，上升0.34nm。所以每10个碱基对形成一个螺旋，螺距3.4nm。 6.影响双螺旋结构稳定性的因素： a.碱基堆积力（范德华力），是维持DNA双螺旋结构的主要因素； b.氢键，G+C含量越高，DNA越稳定； c.离子键，组蛋白和正离子与磷酸负电荷形成离子键，有助于DNA分子稳定。 7.DNA的三级结构：DNA双螺旋进一步折叠、卷曲形成的构象。超螺旋分为正超螺旋和负超螺旋。 8.负超螺旋：当螺旋旋转360?时，其相应碱基对数小于10，二级结构处于松缠状态。 天然DNA均为负超螺旋。 Ⅱ RNA的分子结构 1．RNA的结构特点 ：RNA一级结构的连接方式：3,5-磷酸二酯键连接各核苷酸；RNA二级结构的共性:有局部的双螺旋结构，即茎环结构 2.mRNA分子：mRNA是蛋白质生物合成的模板；含量少，种类多。 3.mRNA 5端无帽子结构功能：一是可以与蛋白质结合，对翻译起识别作用；二是稳定mRNA的作用。 4.原核生物和真核生物的mRNA在结构上有所不同：1)原核生物的mRNA是多顺反子的，真核生物的mRNA是单顺反子的；2)原核mRNA 5 端无帽子结构，真核mRNA 5 端有一段帽子结构（m7GpppNmpNmp-）；3)原核mRNA 3 ’端无PolyA，真核mRNA 3 5.tRNA分子功能：(转运RNA)，负责运送氨基酸 6.tRNA一级结构的共同特点：分子量小，只有70-90个核苷酸组成的单链。 7.tRNA的二级结构：为“三叶草形”。 ①在3’端以CCA为主的单链区。 ②大约有50%的核苷酸配对，形成四臂：氨基酸接受臂；二氢尿嘧啶臂（D臂）；反密码臂；T?C臂。 ③大约有50%的核苷酸不配对，形成四环：二氢尿嘧啶环（D环）；反密码环：额外环（可变环）；T?C环。 ④不同的tRNA分子在长度上发生变化的三个区域：D臂、D环、额外环的核苷酸数目不同。 8.．tRNA的三级结构：倒L型，这是tRNA具生物学功能的结构 ，稳定其倒L型的主要因素：（即三级结构作用力）：碱基堆积力，氢键 。 9．rRNA分子：单链, 存在于核糖体中，种类少、含量高(最高)；二级结构由单链回折形成的局部螺旋区和突环组成。功能：与蛋白质组成核糖体，成为蛋白质合成的场所。 10.核糖体：即核蛋白体，由rRNA和蛋白质组成。 （三） 核酸的理化性质 1．核酸的一般性质： DNA为白色纤维状固体; RNA为白色粉末状固体；粘度 DNARNA 溶解性 ：微溶于水，不溶于有机溶剂,如乙醇、乙醚和氯仿，易溶于低盐缓冲液，如EDTA 2等电点 (pI):两性电解质在一定的pH环境中，正负离子解离度相等，净电荷为零，在电场中不移动，此时溶液的