正柴胡饮体外抗甲型流感病毒和乙型流感病毒作用的研究.docxVIP

正柴胡饮体外抗甲型流感病毒和乙 型流感病毒作用的研究 【摘要】 为探讨中药复方正柴胡饮的 抗病毒作用，从体外抗病毒实验对其抑制甲 型流感病毒和乙型流感病毒的作用进行了 研究。结果显示：中药复方正柴胡饮在无毒 浓度g / L、g / L分别对FMt昆科70B有 明显的抑制病毒致细胞病变作用。 【关键词】 感冒/中药疗法；甲型流感病 毒；乙型流感病毒；正粘病毒/药物作用 流行型感冒是由流感病毒引起的急性 传染病，以其病原的易变性和疾病的传播速 度快而着称。临床特征为呼吸道症状较轻而 发热、全身酸痛、乏力等中毒症状较重。对 老年人、儿童和有潜在健康问题的人有合并 并发症甚至致命的危险， 但目前合成药中尚 无理想的能消除症状的抗病毒药物问世 ：1] 古方正柴胡饮，由明代着名医家张介宾所创， 对外感风寒诸疾颇具疗效。为研究其对流感 病毒的抑制作用，我们选择了甲型流感病毒 (FM1)和乙型流感病毒(昆科70B)两种流感 病毒进行了体外抗病毒作用的实验研究。 1材料与方法 实验材料 药物正柴胡饮全方六味（柴胡、陈皮、 防风、芍药、甘草、生姜等）。实验用药均 经生药鉴定并按原方比例水煎浓缩， 由本所 实验室制备。阳性对照药物三氮哇核昔（病 毒哇），由湖北省医工所提供，批号010804。 毒种 FM1由中国医学科学院医药生物技术 研究所提供，于狗肾细胞株（MDCK涧肾细胞 传代，以病变鸡红血球血凝法来判断其滴度， 在35C、5%CO2?养箱培养。 昆科70B由昆明医学研究所提供，于 MDCK句肾细胞传代，以病变及鸡红血球血凝 法来判断其滴度，在 35C, 5% CO2培养箱 培养。 细胞MDCK引自广州市儿童医院病毒室。 细胞培养液和维持液 各为含10%、2% 小牛血清，100 kU / L青霉素，链霉素的 DMEM（G旧COBRI公司产品）。 方法抗病毒实验在96孔微量板上进行, 每孔ml ,细胞数为3X 104个，长成单层后， 将药液用维持液稀释成不同浓度， 抛掉原培 养液后将不同浓度的药液加入细胞孔中， ml/孔，以细胞不出现病变的最小稀释度为 该药液对细胞的无毒界限。通过毒性试验观 察到正柴胡饮药液g/L和病毒哇1 g/L浓 度对细胞生长无明显影响， 同时在相应敏感 细胞上测定攻击病毒之 TCID 50。实验时设 病毒对照、细胞对照、药物毒性对照及三氮 哇核昔（病毒哇）对照，置37 C CO2培养箱 内，每天在倒置显微镜下观察病变并记录。 当病毒对照孔细胞出现+++W变时，继续观 察4 d则终止。细胞出现病变的程度按以下 6级标准记录：细胞生长正常，无病变出现； 细胞病变少于整个单层细胞的 10% ;细胞病 变约占整个单层细胞的 25% ;细胞病变约占 整个单层细胞的50% ;细胞病变约占整个单 层细胞的75% ;细胞病变约占整个单层细胞 的75%以上。 2结果 表1结果表明：正柴胡饮煎剂在 g / L 浓度下，对FM1有较好的抑制病变作用，在 g/ L浓度下对昆科70B有较好的抑制病变作 用。阳性药病毒哇25 p g/ml时能完全抑制 病毒所致病变。该实验重复 2次，结果与表 1完全一致。 表1正柴胡饮在MDCKt对病毒致病变 抑制作用 注：+表示不抑制；-表示抑制。 3讨论 流感在现代医学认为，是由病毒引起， 病毒感染首先入侵鼻咽、口咽、喉部等呼吸 道的纤毛柱状上皮细胞内进行复制，借神经 氨酸酶的作用而释出，再侵入其他柱状上皮 细胞引起变性、坏死、脱落，从而引起感冒 症状。每年全球约有10%的人口即6亿人患 流行性感冒，我国被国际上公认是流感的多 发地。自1957年以来3次流感大流行均首 发于我国，且在香港地区和内地分别发现了 禽H5N1和H9N2亚型毒株能感染人[2],严 重危胁人类健康。目前西方和国内临床用于 抗流感病毒的药物有金刚烷胺 (amatadine)、 甲基金刚烷胺(rimantadine)、病毒口坐 (Virazole)等，前二者可引起中枢性眩晕和 迅速耐药毒株的出现[1],而低剂量口服病 毒口坐g/d无明显抗病毒作用，大剂量口服对 无并发症流感患者退热与症状消除的作用 较快:3],但大剂量口服的毒性较大，且对 乙型流感无治疗作用。 祖国传统医学中用中 草药治疗流感历史悠久。流感，在祖国医学 属风寒伤于足太阳经，即时病的范畴。现代 的体外实验也证实了中草药的抗病毒作用。 中药复方正柴胡饮引自古方，清热解毒，解 热镇痛，亦有对病毒的抑制作用。我们的实 验显示：正柴胡饮在无毒浓度 g/L下在体 外对FM1有较好的抑制作用，在无毒浓度g / L下在体外对昆科70B有较好的抑制作用。 此次实验采用效果确切的抗病毒药物病毒 哇做阳性药物，与正柴胡饮进行对照，实验 结果确实可信，我们将在此基础上做进一步 的研究。 【参考文献】