微生物学与免疫学：7微生物遗传与变异.pptVIP

局限转导 通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌并表达的转导现象。 供体菌基因 →（部分缺陷噬菌体）→ 受体菌 举例： E.coli 的λ噬菌体，在其插入位点两侧为gal和bio基因，不正常切割时可包装入噬菌体外壳，形成缺陷噬菌体，再感染时形成局限性转导。 与噬菌体核酸部分相连接的DNA片段 局限性转导过程 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点，宿主细胞发生溶原化 溶源菌因诱导而发生裂解时，在前噬菌体二侧的少数宿主基因因偶尔发生的不正常切割而连在噬菌体DNA上 部分缺陷的温和噬菌体 把少数特定基因转移到受体菌中 1、低频转导（low frequency transduction，LFT） 温和噬菌体λ裂解时的不正常切割：包含gal或bio基因。 缺陷噬菌体在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装，提供所需要的裂解功能，形成转导颗粒。但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力，感染受体细胞后，通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的转导子。 2、高频转导（high frequency transduction，HFT） gal 10－6 gal λ噬菌体感染E.coli λ噬菌体误切割 LFT裂解物＋噬菌体感染E.coli 双重溶源菌 LFT裂解物 50% 50% 2、高频转导（high frequency transduction，HFT） 形成阳性转导子 形成噬菌斑 gal－ gal gal－ LFT裂解物感染E.coli（gal-） 双重溶源菌 HFT裂解物 局限转导 供体菌 温和噬菌体侵染 溶源菌 UV等诱导 正常切离 不正常切离 正常噬菌体(λ,大量) 部分缺陷噬菌体(λdgal/λdbio) LFT裂解物 准备过程 真正转导 侵染受体菌 高感染复数 低感染复数 双重溶源菌(λ,λdgal) 局限转导子 （低频转导） 诱导切离 λ帮助λdgal复制 HFT裂解物(等量λ,λdgal) 局限转导子（高频转导） 低感染复数下侵染受体菌 转化、转导、接合的比较 　　温和噬菌体感染细胞后使之发生溶源化，因噬菌体的基因整合到宿主染色体上，而使后者获得了新性状的现象。 溶源转变与转导的不同： ①不携带任何供体菌的基因； ②这种噬菌体是完整的，而不是缺陷的。 溶源转变（lysogenic conversion） 噬菌体 受体菌 携带供体菌基因 烈性/温和 完整/缺陷 基因 新性状 普遍转导 是 均可 完全缺陷 带有外源供体菌基因 可稳定遗传 局限转导 是 温和 部分缺陷 噬菌体转变 否 温和 完整 只带有噬菌体基因 随噬菌体消失而消失 本章重点：遗传和变异的概念； 微生物的遗传物质； 基因突变的概念，分子机制； 转化、接合、转导。 了解：基因符号和术语； 突变株类型与应用； 噬菌体分离测定与应用。 讨论： 基因突变的分子机制有哪些？ 请简述亚硝酸的诱变机制。 1. 转化（transformation）： 　游离DNA分子 + 感受态细胞 2. 接合（conjugation）： 　细胞与细胞的直接接触（由F因子介导） 3. 转导（transduction）： 　由噬菌体介导 4.原生质体融合 两种菌除去细胞壁、细胞膜，人工融合 细菌的三种水平基因转移形式—— 转化　受体菌（recipient, receptor）接受供体菌（donor）裸露的DNA片段，从而获得供体菌部分遗传性状的现象。 转化子 转化成功的菌株成为转化子（transformant） 受体菌 转化基因的接受者 recipient/receptor 供体菌 转化基因的提供者donor 转化因子 起转化作用的DNA片段 一、转化（transformation） 1.对于供体菌：外源DNA为双链DNA；有相对高的分子量，一般在106～108。 2.供体菌和受体菌间有一定的亲缘关系：同源性。 3.对于受体菌：必须处于感受态(competence)。 感受态是受体菌最易接受外源DNA片断并进行转化的生理状态； 处于感受态的细胞，其吸收DNA的能力，有时可比一般细胞大100倍； 感受态的出现受该菌的遗传性、菌龄、生理状态和培养条件等的影响。 （一）转化的条件 感受态细胞的制备 从大肠杆菌DH5α的培养平板上挑取一个单菌落接于 2mLLB液体培养基的试管中，37℃振荡培养过夜。 ↓ 以1%的接种