目基因供体细胞受体细胞思考题.pptVIP

工录其应  基因工程 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物 的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放 到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的性 状 原理:基因重组操作水平:DNA分子水平 操作环境:生物体外 结果:定向改造生物的性状,获得人类所需 要的品种。 供体细胞→→目的基因—受体细胞  思考题:在以上把人的胰岛素基因“嫁接” 到大肠杆菌上的过程中,关键步骤或难点是 什么? 关键步骤一:胰岛素基因怎样从人的细胞内提取? 关键步骤二:胰岛素基因由谁负责“运输”? 关键步骤三:胰岛素基因怎样进入到大肠杆菌细胞内? 在关键步骤的完成过程中都要用哪些基因操 作工具? 关键步骤一的工具:基因的剪刀—限制性内切酶 关键步骤二的工具:基因的针线—DNA连接酶 关键步骤三的工具:基因的运输工具—运载体  基因操作的工具 1.基因的“剪刀”——限制性内切酶(限 制酶) 种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序 列,并在特定的切割点上将DNA分子切断。 专一性 CT T 黏t  基因工程的基本工具 (1)基因的“剪刀”:限制性核酸内切酶 ②作用特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。 ③结果:产生黏性未端(碱基互补配对)。 ④举例:大肠杆菌的一种EcO限制酶识别GAT℃序列,并 在G和A之间切开)。 黏性末端 A AT T C T AA 黏性末端  GAATTC GAATTC CT T G CT T 用同种限制酶切割 AATTC AATTC CT T 基因的针线:DNA连接酶 GAATT C CT T  G AA TT C CTTAA G 被同一种限制酶切断的几个DNA是否 具有相同的黏性末端? G TT C C A G  2、基因的针线—DNA连接酶 AA TT C C TT AA G 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性 末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。  3、基因的运输工具—运載体 常用的运载体:质粒 噬菌体和动植物病毒 DNA 大肠杆菌细胞 质粒 抗菌素抗性基因—标记基因, 便于进行 控制质粒DNA 检测。 转移的基因  三、工程基本步骤 第一步:获取目的基因: 1从供体细胞的DNA中直接分离基因 2.人工合成基因