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维生素 C的测定方法 郑世豪 {摘要}： 维生素 C 亦称抗坏血酸， 具有氧化还原功能， 广泛参与细胞间质的合成 及解毒过程等作用，它能帮助减低臭氧、二氧化碳等空气污染毒性抑制膳食 中有致癌作用的亚硝胺的合成， 还具有降低血铅浓度的作用， 既能保持皮肤弹性，延缓衰老， 又有助于消除人体不可缺少的营养素之一， 故许多人把它作为防病治病的灵丹妙药， 殊不知应用合理与否，会产生不同的作用。 {关键词 }：维生素 C 测定原理、检测方法 引言 维生素 C 是可溶于水的无色结晶， 是一种分子结构最简单的维生素。 维生素 C 有防治坏血病的功能， 所以在医药 上常把它叫做抗坏血酸。 维生素 C 在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定，维生素 C 开始氧化为脱氢型抗坏血酸 (有生理作 用 )。维生素 C 能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。 其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿 子叶、 猕猴桃、 柑橘等食品中含量尤为 丰富。 准确测定维生素 C 的含量， 对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。本文总结近年来的文献报道维生素 测定方法主要有滴定法、荧光法、光度分析法、高效液相色谱法。 滴定法测定维生素 C 测定原理 2， 6 一二氯靛酚法和碘量法是较 常见的滴定测定维生素 C 的方法。还原型抗坏血酸还原染料 2，6 一二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色， 被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原 2， 6 一二 氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时， 一定量的样品提取液还原标准 2， 6- 二氯靛酚的量 与样品中所含维生素 C 的量成正比。碘量法的原理： 维生素 C 包括氧化 型、还原型和二酮古乐糖酸三种， 当用碘滴定维生素 C 时，所滴定的碘被维生 素 C 还原为碘离子， 随着滴定过程中维生素 C 全被氧化， 所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉） 的溶液产生蓝色， 即为滴定终点。 测定操作 2， 6 一二氯靛酚法：取适量的样品可食部，加入 100 mL 2% 草酸溶液， 制成匀浆。取同一样品匀浆 10g，加入 1%草酸溶液 20 mL ，摇匀，用滤纸过滤， 取 5mL 过滤液于锥形瓶中，用 2，6 一 二 氯 靛 酚 钠 盐 溶 液 滴 定 (1 mL ≈ mgVitC) ，以淡红色存在 30 s 内不褪色 为滴定终点。记录 2， 6-二氯酚靛酚钠 盐溶液的消耗量， 根据结果计算出样品 中维生素 C 含量 (mg/100 g) 。 碘量法的原理： 维生素 C 包括氧化 型、还原型和二酮古乐糖酸三种， 当用 碘滴定维生素 C 时，所滴定的碘被维生素 C 还原为碘离子， 随着滴定过程中维 生素 C 全被氧化， 所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉） 的溶液产生蓝色， 即为滴定终点。 荧光法测定维生素 C 测定原理： Deutsch 和 Weeks 曾经报道过一种 检测维生素 C 的荧光分析法 (OPDA)， 并被指定为维生素 C 的经典荧光分析法。在该方法中， 维生素 C 先被活性炭 (Norit) 氧 化 为脱 氢 抗 坏 血酸 (DHAA) ， DHAA 再与荧光底物邻苯二胺(OPDA) 结合生成荧光产物， 通过对该荧光产物 的检测实现对维生素 C 的定量分析。 孙 振艳等 [1] 提出了一种新的测定维生素 C 的荧光分析方法。基于维生素 C 被 Cu2+氧化为 DHAA， DHAA 进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用， 通过对体系荧光强度的测定进行维生素 C 的定量分析。 测定操作： 荧光分析法 (OPDA) 的测定方法： 称 取一定量样品， 研磨后用水浸泡， 取清液加入适量 1%草酸溶液， 振摇约 3min ，加入 0.2g 已处理好的活性炭再充分振 摇约 3min 后过滤，滤液加于两个 25mL 比色管再加入缓冲溶液 ,，其中一管加入硼酸溶液 (即空白 )摇匀，放置 15min 后，两管均加入邻苯二胺溶液 10mL ，避光放置 30min 待测。样品荧光强度减去空白荧光强度值即为样品相对荧光强度值。 孙振艳等的荧光分析法： 在 25 mL 比色 管中依次加入 0. 6 mL CuSO4 溶液，2. 0 mL 十六烷基三甲基溴化铵溶液， 2. 0 mL 苯甲酸溶液，一定体积的维生素 C 标准溶液， ， 5. 0 mLNaOH- 邻苯二甲酸 氢钾缓冲溶液，用蒸馏水定容，摇匀。 在 35℃恒温水浴中加热 30 min ，将溶 液流水冷却至室温，激发波长为 308 nm ，在发射波长 408nm 处，测量荧光强度 F，以不含维生素 C 的试剂空白为F0，计算 F=F-F。 光度分析法测定维