农业部1193号公告-2-2009-转基因植物及其产品成分检测耐除草剂油菜Topas19-2及其衍生品种定性PCR方法.pdfVIP

ICS 65．020．01 B04 中华人民共和 国国家标准 农业部1193号公告一2—2009 转基因植物及其产品成分检测 9／2及其衍生品种 耐除草剂油菜Topasl 定性PCR方法 Detectionof modifiedanddelved geneticallyplants products methodfor PCR herbicide-tolerant19／2 Qualitative rapeseedTopas anditsderivates 2009-04—23发布 中华人民共和国农业部发布 农业部1193号公告一2--2009 前 言 本标准由中华人民共和国农业部科技教育司提出。 本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：农业部科技发展中心、中国农业科学院油料作物研究所。 本标准主要起草人：卢长明、刘信、武玉花、吴刚、雷绍荣、肖玲、厉建萌。 农业部1193号公告一：)__2009 转基因植物及其产品成分检测 1 912及其衍生品种定性PCR方法 耐除草剂油菜Topas 1范围 19／2转化体特异性定性PCR检测方法。 本标准规定了转基因耐除草剂油菜Topas 19／2的定性 本标准适用于转基因耐除草剂油菜Topas19／2及其衍生品种，以及制品中Topas PCR检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明El期的引用文件，其随后所 有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研 究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适合于本标准。 NY／T672转基因植物及其产品检测通用要求 NY／T673转基因植物及其产品检测抽样 NY／T674转基因植物及其产品检测DNA提取和纯化 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3 1 HMGl／v基因HMGI／l，gene Mobile Protein 编码高移动簇蛋白I／Y(HighGroup I／Y)的基因。 3．2 of 1912转化体特异性序列event-specificsequenceTopas19／2 Topas Topas 菜基因组的部分序列。 4原理 根据耐除草剂油菜Topas19／2转化体特异性序列设计特异性引物，对试样DNA进行PCR扩增。 依据是否扩增获得110bp的预期DNA片段，判断样品中是否含有Topasl9／2转化体成分。 5试剂和材料 使用分析纯试剂和重蒸馏水。 51琼脂糖。 52 109／L溴化乙锭溶液：称取1．0g溴化乙锭(EB)，溶解于lOOmL水中。 注：EB有致癌作用，配制和使用时应戴一次性手套操作并妥善处理废液。 5．3 10tool／L氢氧化钠溶液：称取80．0 mL。 5．4 8．o)：称取18．6