动物细胞特点与组织培养生产特性.ppt

动物细胞特点和组织培养生产特性; 动物体内取出组织和细胞，在体外模拟机体内的生理 条件，建立无菌、适温和一定的营养条件，使之生长 和生存，并维持其结构和功能的技术，称动物细胞与 组织培养。 是动物细胞工程的重要技术基础：细胞融合、组织 工程、胚胎工程、干细胞工程、动物克隆、动物细胞 产品的大规模制备技术等等都离不开～。;4.1 概 述;4. 1.1 发展历史;4. 1.1 发展历史;4. 1.1 发展历史;4.1.2 动物细胞的特点;4.1.2 动物细胞的特点;4.1.3 动物细胞与组织培养的概念;4.1.4体外培养细胞的分型;贴附型细胞(anchorage-dependent cell);贴附型细胞;贴附型细胞;影响细胞形态的主要因素;非贴附型细胞或悬浮型细胞（suspend cell）;4.1.5 体外培养细胞的生长特性;4.1.5 体外培养细胞的生长特性;4.1.6 体外培养细胞的生长与增殖过程;4.1.6.1 细胞系的生长过程：;4.1.6.1 细胞系的生长过程：; 体 外 培 养 细 胞 系 的 生 长 曲 线; 4.1.6.2 每代（群体）细胞的生长过程;4.1.6.2 每代（群体）细胞的生长过程;4.1.6.2 每代（群体）细胞的生长过程;细胞浓度的对数;4.2 动物细胞与组织培养的基本技术;4.2.1 体外培养的特点;4.2.2 培养条件和工具;4.2.2 培养条件和工具;4.2.2 培养条件——培养基;4.2.2 培养条件——天然培养基;4.2.2 培养条件——培养基;4.2.2 培养条件——培养基;4.2.2 培养条件——培养基;4.2.3 原代培养与传代培养技术;4.2.3.1 原代培养;4.2.4 贴壁培养技术;4.2.4.2 贴壁培养的生长特性;4.2.5 动物细胞培养的传统方法;4.2.5.1 悬滴培养法;4.2.5.2 旋转管培养法;4.2.5.3 灌注小室培养法;4.2.5.4 培养瓶培养法;4.2.5.5 培养板培养法; 4.2.6 动物细胞大规模培养技术; 4.2.6.1 悬浮培养技术;;4.2.6.2 微载体培养技术;4.2.6.2 微载体培养技术;4.2.6.3 微囊化培养技术;4.2.6.4 中空纤维法;4.2.6.5 微多孔载体培养技术; 4.2.6.5 微多孔载体培养技术;; 4.2.6.5 微多孔载体的制备方法; 4.2.6.5 微多孔载体的制备方法; 2.4.6.5 微多孔载体的制备方法; 4.2.6.5 微多孔载体的制备方法;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养的应用; 4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;关键技术——细胞培养环境：;关键技术——细胞培养环境：;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;4.2.7 动物细胞生物反应器大规模培养;4.2.8 动物细胞体外培养现状与展望;4.2.8 动物细胞体外培养现状与展望;4.3 组织工程; 4.3.1.2 修复缺损器官的方法;4.3.1.3 组织工程修复缺损器官;4.3.1.4 组织工程现状;4.3.2 组织培养;4.3.2.1 上皮组织的体外培养;4.3.2.1 上皮组织的体外培养;4.3.2.1 上皮组织的体外培养; 3、培养过程： （1）3T3细胞的传代培养：小鼠胚胎瘤成纤维细胞系3T3 → PBS平衡液洗涤 →胰蛋白酶-EDTA消化 →细胞变圆（显微镜 下观察） →弃消化液，加角质形成细胞培养液（消化液体积的 3倍）→吹打分散细胞→接种培养，3~5天发生融合→接近融合 成单层时→传代培养。 （2）饲养层细胞的制备：3T3细胞覆盖瓶底一半时→换培养 液→培养24h →接近融合→加1~10 μg ∕ml丝裂霉素C，培养 12h →培养液洗涤细胞3次→胰蛋白酶消化→种植在培养瓶中 →加角质形成细胞培养液→37℃培养→贴壁后12h（再种植角 质形成细胞）。 （3）角质形成细胞的培养与传代：取材消毒、分离皮肤和 皮下组织，切成2~3mm小快→中性蛋白酶消化（4 ℃ 过夜或37 ℃ 2~4