生物化学实验：地衣酚法测定RNA含量.pptVIP

地衣酚法测定RNA含量 地衣酚法 ? 实验材料 ? 计算 * * ? 目的 学习和掌握地衣酚法测定RNA含量的原理和方法。 ? 原理 紫外吸收法 定磷法 地衣酚法 盐酸 RNA + 糠醛 + ￡ 在酸性溶液中，RNA与地衣酚试剂共热生成蓝色化合物，该物质在670nm有最大吸收 ￡ 在20～200mg/mL范围内其峰值与RNA含量成正比 核糖 地衣酚试剂 盐酸 蓝色化合物 1. 试剂 200μg/mL RNA标准溶液、地衣酚试剂 2. 器材 可见分光光度计、恒温水浴锅、移液管 ? 实验方法 2 0 2.0 5 光密度值 100℃恒温水浴中保温15min，冷却，在670nm波长处比色 2 2 2 2 2 地衣酚试剂/mL 0.4 0.8 1.2 1.6 2 蒸馏水/mL 1.6 1.2 0.8 0.4 0 标准RNA/mL (200 μg/mL) 4 3 2 1 0 试管 标准曲线的制作 光密度值 100℃恒温水浴中保温15min，冷却，在670nm波长处比色 2 2 2 地衣酚试剂/mL 1.6 1.6 2 蒸馏水/mL 0.4 0.4 0 待测液/mL 2 1 0 试管 样品测定 RNA含量(μg/mL) = 标准曲线查得值 X 5