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高级生物化学复习资料 一.生物大分子的结构与功能 1.中心法则 2.DNA 碱基的组成特点（Chargaff 规则） 1. 同一生物的不同组织的 DNA 碱基组成相同； 2. 同一种生物 DNA 碱基组成不随生物体的年龄、营养状态或者环境变化而改变； 3. 几乎所有的 DNA，无论种属来源如何，其腺嘌呤摩尔含量与胸腺嘧啶摩尔含量相同［A］ = ［T］，鸟嘌呤摩尔 含量与胞嘧啶摩尔含量相同［G］ = ［C］，总的嘌呤摩尔含量与总的嘧啶摩尔含量相同［A］＋［G］= ［C］＋ ［T］。 4. 不同生物来源的 DNA 碱基组成不同，表现在 A＋T/G＋C 比值的不同。这些结果后来为 DNA 的双螺旋结构模型 提供了一个有力的佐证。 3.DNA 双螺旋结构要点： （1） DNA 分子由两条反向平行的多核苷酸链构成双螺旋结构。两条链围绕同一个“中心轴”形成右手螺旋，螺旋 表面有一条大沟和一条小沟。 （2）嘌呤碱和嘧啶碱层叠于螺旋内侧，碱基平面与纵轴垂直，碱基之间的堆积距离为 0.34nm 。磷酸与脱氧核糖在 外侧，彼此之间通过磷酸二酯键连接，形成 DNA 的骨架。糖环平面与中轴平行。 （3）双螺旋的直径为 2nm，顺轴方向每隔 0.34nm 有一个核苷酸,两个核苷酸之间的夹角为 36º ，因此，沿中心轴每 旋转一周有 10 个核苷酸。 （4）一条多核苷酸链上的嘌呤碱基与另一条链上的嘧啶碱基以氢键相连，匹配成对，配对的原则是 A= T 之间形成 二个氢键，G C 之间形成三个氢键。因此， DNA 的一条链为另一条链的互补链。 4.mRNA 的一级结构特点： （1）大多数真核 mRNA 的 5´末端均在转录后加上一个 7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的 C´2 也是甲基化，形成帽子 7 m 结构：m GpppN -。 （2）大多数真核 mRNA 的 3´末端有一个多聚腺苷酸 (polyA)结构，称为多聚 A 尾。 5.tRNA 的二级结构：单链、三叶草形、四臂四环 高级生物化学复习资料 6.核酸的溶解特性： RNA 和 DNA 都是极性的化合物，两者都微溶于水，不溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂。它们的钠盐易溶于水。 7.核酸的紫外吸收特性：吸收峰是 260nm;变性增色，复性减色。 8.Tm 值：通常把热变性过程中光吸收达到最大吸收一半时的温度称为该 DNA 的熔点或熔解温度，用 Tm 表示。 DNA 的 Tm 值与以下因素有关： （1）、 DNA 的均一性:均一性愈高的样品，熔解过程的温度范围愈小。 （2）、 G-C 的含量：（ G-C）%= （tm-69.3）x2.44 （3）、介质离子强度：介质离子强度较低，DNA 的 tm 也低。 9.OD260 的应用： （1） DNA 或 RNA 的定量 ； （2）判断核酸样品的纯度：DNA 纯品: OD260/OD280 = 1.8；RNA 纯品: OD260/OD280 = 2.0 10.变性： （1）、DNA 变性的概念：指 DNA 分子中的双螺旋结构解链为无规则线性结构的现象。 （2）、DNA 变性的本质：维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构的改变。 （3）、导致 DNA 变性的因素：凡能破坏双螺旋稳定性的因素，如加热、极端的 pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲 醛等，均可引起核酸分子变性。 11.复性：DNA 复性 (renaturation)：变性 DNA 在适当条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构， 这一现象称为复性。热变性的 DNA 经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火 (annealing) 。 12.分子杂交：当两条不同来源的 DNA 链或 DNA 链与 RNA 链之间存在互补顺序时，在复性时可发生碱基互补配对形 成局部双螺旋区，称分子杂交 。 应用： 核酸杂交技术是目前研究核酸结构、功能常用手段之一。 用来检验核酸的缺失、插入； 制备特定的探针（probe）通过杂交技术可进行基因的检测和定位研究。 13.PCR：PCR 即聚合酶链反应，是模拟体内 DNA 复制条件，应用 DNA 聚合酶特异性扩增某一 DNA 片段的技术。体外 程序化的 DNA 合成技术。 二、蛋白质的结构与功能 1.氨基