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乳酸脱氢酶测定方法 我们知道，现实生活中存在着各种各样的的酶， 这些酶可以单独作 用，也可以相互作用，对我们的人体产生很大的影响，但是相信大家 对于酶的测定方法还不是很熟悉吧，不同酶的测定有不同的方式方 法，而且方式方法也种类不一， 现如今乳酸脱氢酶测定方法成为很多 人研究的领域话题， 那么到底该如何测定呢， 下面就让我们一起来了 解一下乳酸脱氢酶测定方法吧。方法：实验开始前，请提前配置好所 有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次 检测都应该做标准曲线。 如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释， 以使样品符合试剂盒的检测范围。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、 待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100μl，余孔分别加标准品或待测 样品 100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量 不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜， 37℃反应 120 分 钟。为保证实验结果有效性， 每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃 去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加 99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制， 轻轻混匀，在使用前一小时内配制） ，37℃，60 分钟。3. 温育 60 分钟后， 弃去孔内液体，甩干，洗板 3 次，每次浸泡 1-2 分钟， 350μl/每孔， 甩干。 4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记 抗体工作液） 100μl，37℃， 60 分钟。 5. 温育 60 分钟后，弃去孔内 液体，甩干，洗板 5 次，每次浸泡 1-2 分钟，350μl/每孔，甩干。6. 依 序每孔加底物溶液 90μl，37℃避光显色（ 30 分钟内，此时肉眼可见 标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔梯度不明显，即可终 止）。7. 依序每孔加终止溶液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。 终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。 为了保证实验结 果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在 450nm 波长依序测量各孔的光密度（ OD 值）。 在加终止液后 15 分 钟以内进行检测。 以上内容为我们介绍了乳酸脱氢酶测定方法， 我相 信这些内容可以引起大家的兴趣， 我相信大家可以有效的最快的直接 的测定出乳酸脱氢酶， 可能你也是一个研究爱好者， 那就赶快去实践 一翻吧！