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高温灭菌方法 : 干热灭菌 焚烧; 干热灭菌, 160 ℃ 1-2h ,适用于玻璃、金属器皿 湿热灭菌 高压蒸汽灭菌; 间歇灭菌法, 100 ℃ 15-30min , 37 ℃保温一天,再 以同样方法加热,反复三次。 缺点:费时,适用于不耐热药品、营养物、特殊培养 基或缺乏高温设备时,也可用于一般物品灭菌。 消毒方法 : 煮沸消毒法 : 100 ℃ 15min ,加入 1% Na2CO3 、 2-5% 石炭酸效果更好,适用于注射器、解剖器具消毒 巴斯德消毒法 :采用 60-70 ℃处理 15-30min ,可以去 除食品(酒、牛奶等)的病原微生物。 低温维持法 :只要在 63 ℃下维持 30min 高温瞬时法 :只要在 72 ℃下维持 15s 超高温法 :只要在 135-150 ℃下维持 2-6s 五、极端 pH 过高过低 pH 对微生物生长都不利,表现在: 1 、 pH 过低,引起微生物表面由负电荷变为带正电, 影响微生物对营养物的吸收 2 、影响培养基中有机化合物的离子化作用,间接影 响微生物 3 、 pH 适宜时才能使酶发挥最大活性 4 、过高过低 pH 都降低微生物对高温的抵抗能力 强酸强碱具有杀菌力。无机酸腐蚀性大,实际上不 作消毒剂,某些有机酸如苯甲酸可作消毒剂。强碱可 用作杀菌剂,但毒性大。对 G- 与病毒的作用比 G+ 强。 六、干燥 干燥(指水活度低至 0.60-0.70 )会使微生物的 代谢活动停止,有机体基本处于休眠状态,严重 时会引起细胞脱水和蛋白质变性进而引起死亡。 不同微生物抗干燥能力不同。大多数腐生或寄 生细菌的营养细胞可在大气下干化死亡。一般小 型细胞、细胞壁厚的细胞、圆形细胞和孢子、芽 孢、胞囊较耐干燥。 1 、嗜冷菌 专性嗜冷菌 :最适 5-15 ℃, 最低 -12 ℃,两极地区。 兼性嗜冷菌 :最适 10-20 ℃ ,最低, -5-0 ℃,海水及冷 藏食品 李斯特菌 嗜冷微生物能在低温下生长的 机制 在于: ( 1 )酶在低温下仍能有效地发挥作用 ( 2 )细胞膜中不饱和脂肪酸含量较高,低温下仍能保 持流动状态。低温致死的原因是细胞内水分变成冰晶 ,造成细胞脱水,还造成细胞尤其是细胞膜的损伤。 2 、嗜热菌 : 适于在 45-50 ℃中生长,主要分布在温泉、堆肥 和土壤中。 机制 : ( 1 )酶和蛋白质比中温型更能抗热 ( 2 )产生多胺、热亚胺和高温精胺,可稳定细胞中 与蛋白质合成有关的结构和保护大分子免受高温的 损害 ( 3 )核酸也有保证热稳定性的结构 ( 4 )细胞膜中含有较多的饱和脂肪酸和直链脂肪酸 ,使膜具有热稳定性 ( 5 )生长速率快,合成大分子迅速,可及时弥补由 于热所造成的大分子的破坏 二、 pH 环境中的 pH 对微生物生命活动影响很大: 1 、引起细胞膜电荷的变化,影响微生物对营养 物质的吸收 2 、影响代谢过程中酶的活性 3 、改变生长环境中营养物质的可给性及有害物 质的毒性 不同微生物生长所需的 pH 不同。大多数微生物最 适 pH 6.5-7.5 ,适应范围在 pH 4-10 之间。 能在 pH 1-5 范围内生长的微生物称为 专性嗜酸微生 物 ,如氧化硫硫杆菌、酸热硫化叶菌; 能在酸性条件下也能在中性条件下生长的为 兼性嗜 酸微生物 ; 能在高 pH 下生长的为 嗜碱性微生物 ,如巴氏芽孢 杆菌能在 pH 11.2-11.6 条件下生长(最适 pH 9.6 )。 微生物 最低 pH 最适 pH 最高 pH 细菌 3-5 6.5-7.5 8-10 酵母菌 2-3 4.5-5.5 7-8 霉菌 1-3 4.5-5.5 7-8 在培养微生物的过程中,随着微生物的生长繁殖 和代谢进行, pH 会变化: 碳源 :葡萄糖、乳糖 → 有机酸 —— pH 下降 氮源 :蛋白质、蛋白胨、氨基酸 → 氨、胺类 —— pH 上升 ( NH 4 ) 2 SO 4 →SO 4 2- —— pH 下降 Na 2 NO 3 →NO 3 2- 被吸收 —— pH 上升 尿素 → 氨 —
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