2020高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1.pptVIP

生物选修 1 （人教版） 专题 5 DNA 和蛋白质技术 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定 要点突破 一、 DNA 粗提取的原理 1 ． DNA 溶解度 2.DNA 与蛋白质对蛋白酶、高温、洗涤剂的耐受性的区别 盐析和高温对 DNA 活性的影响不同 ①盐析过程中 DNA 的空间结构不变，没有变性，只是溶解度降低。 ②高温使 DNA 和蛋白质变性时破坏的键不同。 DNA 变性时，氢键被破坏，而 蛋白质变性时往往破坏二硫键，因此降温时 DNA 能复性，而蛋白质不能。 例 1 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度有两重性，随 NaCl 溶液浓度的变化 而变化，则下图所示能反映 DNA 的溶解度与 NaCl 溶液浓度之间关系 的是 ( ) 解析： DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最低。 答案： C ? 变式训练 1. 若选择的实验材料为植物细胞，则破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和 食盐。加入洗涤剂的目的是 () A ．利于 DNA 的溶解 B ．分离 DNA 和蛋白质 C ．溶解细胞膜 D ．溶解蛋白质 解析： 洗涤剂是一种离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于 DNA 的释放；食 盐的主要成分是 NaCl ，有利于 DNA 的溶解。 答案： C 二、 DNA 粗提取和鉴定的实验过程的分析 1 ． 方法步骤 2 ． DNA 粗提取与鉴定实验中的数字总结 (1)1 次加入酒精：提取含杂质较少的 DNA 。 DNA 不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。在含 DNA 的溶 液中加入冷却的体积分数为 95% 的酒精，其目的是为了提取含杂质较少 的 DNA 。 (2)2 次加入蒸馏水：目的不同。 第一次向鸡血细胞液中加入蒸馏水，是为了得到浓度低于血细胞内部浓 度的溶液。这样水分子会大量渗入血细胞中，使血细胞吸水涨破而释放 DNA 。 第二次向 2 mol/L NaCl 溶液中加入蒸馏水，是为了使 NaCl 溶液的浓度降低到 0.14 mol/L ，从而使 DNA 分子从 NaCl 溶液中析出。 (3)3 次过滤： DNA 存在的部分及所用的纱布层数不同。 第一次过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，是为了得到含 DNA 的滤液，使 用的纱布为 1 ～ 2 层。 第二次过滤含有黏稠物的 NaCl 溶液，是为了得到从低浓度的 NaCl 溶液中析 出的附着在纱布上的含 DNA 的黏稠物，所用的纱布为多层。 第三次过滤溶解有 DNA 的 NaCl 溶液，目的是为了使 DNA 再溶解，所以只要 用两层纱布即可。 (4)4 次调整 NaCl 溶液的浓度：目的不同、使用的 NaCl 溶液的浓度不同。 第一次在含 DNA 的滤液中，加入 NaCl ，调整 NaCl 溶液的物质的量浓度为 2 mol/L ， 必须充分混合均匀。目的是加速染色质中 DNA 与蛋白质的分离，使 DNA 充分游 离并溶解在 NaCl 溶液中。 第二次调整 NaCl 溶液的物质的量浓度为 0.14 mol/L ，此时 DNA 的溶解度最小，目 的是析出 DNA 。 第三次调整 NaCl 溶液的物质的量浓度为 2 mol/L ，目的是使 DNA 再次溶解。 第四次调整 NaCl 溶液的物质的量浓度为 0.015 mol/L( 或 2 mol/L) ，目的还 是为了溶解 DNA 。 (5)6 次用玻璃棒搅拌：目的不同。 第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液，目的是加速鸡血细胞的破裂。 第二次搅拌 2 mol/L 含 DNA 的 NaCl 溶液，目的是加速 DNA 的溶解。 第三次搅拌加蒸馏水的 NaCl 溶液，目的是均匀稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L ，以析出更多的 DNA 。 第四次搅拌含 DNA 的 2 mol/L 的 NaCl 溶液，目的是加速 DNA 的溶解。 第五次搅拌体积分数为 95% 的含 DNA 的酒精，目的是提取含杂质较少 的 DNA 。 第六次搅拌 0.015 mol/L( 或 2 mol/L) 含 DNA 的 NaCl 溶液，目的还是加速 DNA 的溶解。 3 ． 该实验成功的关键 (1) 破碎细胞应彻底充分。 (2) 对提取的含杂质较多的 DNA 进行提纯时，所用的酒精必须经过充分预 冷后才能使用。 (3) 实验过程中，搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部，并且搅拌要轻缓，以便 获得较完整的 DNA 分子。 (4) 由于玻璃表面带