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DNA的生物合成;DNA复制 ; 复制是指以亲代DNA为模板合成子链DNA的过程。;复制的方式——半保留复制
双向复制
半不连续复制
复制的高保真性;;密度梯度实验 ;按半保留复制方式,子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致,即子代保留了亲代的全部遗传信息,体现了遗传的保守性。;DNA从起始点(origin)向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制。 ;2.真核生物每个染色体有多个起始点,是多复制子的复制。习惯上把从一个DNA复制起始点到终止点的复制区域称为复制子。复制子是独立完成复制的功能单位。 ;(三)复制的半不连续性;领头链:顺着解链方向生成的子链,复制是连续进行的,这股链称为。
随从链:另一股链因为复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长。复制中的不连续片段称为冈崎片段。
领头链连续复制而随从链不连续复制,就是复制的半不连续性。 ;1.DNA-pol的核酸外切酶活性和及时校读;2.复制保真性的碱基选择;二、DNA复制的体系 ;(1)活性:5??3? 的聚合活性;3? ? 5?外切酶活性能辨认错配的碱基对,并将其水解; 5? ? 3?外切酶活性能切除突变的 DNA片段。;大肠杆菌E.coli中的三种DNA聚合酶;(3)真核生物的DNA聚合酶;2.复制中的分子解链及DNA 分子拓扑学变化 ;
(2)解螺旋酶
——利用ATP供能,作用于氢键,使DNA双链解开成为两条单链
(3)单链DNA结合蛋白(single stranded DNA binding protein, SSB)
——在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整 ;(5)DNA连接酶;;三、 DNA复制的过程
(The Process of DNA Replication);;;;领头链的合成;;复制简图; 1.原核生物基因是环状DNA,双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。;;哺乳动物的细胞周期; 1.真核生物每个染色体有多个起始点,是多复制子复制。复制有时序性,即复制子以分组方式激活而不是同步起动。
2.复制的起始需要DNA-polα(引物酶活性)和polδ(解螺旋酶活性)参与。还需拓扑酶和复制因子(replication factor, RF)。
3.增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen, PCNA)在复制起始和延长中起关键作用。 ;;;1. 端粒(telomere)指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。;5.端粒酶催化作用的爬行模型
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