原位杂交技术.docxVIP

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  • 2020-12-12 发布于山东
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原位杂交技术 一、 概述 (一) 概念:原位杂交 ( in situ hybridization, ISH ) 是应用生物化 学中核酸分子杂交 ( nucleic acid molecular hybridization ) 的原理 ,在组织切片、细胞涂片或印片上原位检测某种 DNA 或 RNA 序列的一项技术。是将分子杂交与组织学 相结合的一项技术,也称之为杂交组织化学 (hybridization  histochemistry)  、细胞杂交  (cytological hybridization)  或原位杂交组织化学  (in  situ hybridization histochemistry)。 (二) 历史和现状 可以检测组织细胞本身的或外源的 DNA 或 RNA 序列。 二、 原位杂交的基本原理 核酸分子杂交的基本原理是利用核酸分子 (DNA , RNA) 的碱基对形成氢键的互补性 (A=T , A=U , C=G) ,用一标记的核酸探针去检测与之碱基互补的靶核酸,这与免疫学中抗原-抗体的反应相似。 优点:①分子杂交的特异性强、灵敏度高,同时又有组织细胞化学染色的可见性。 ②既可用新鲜组织, 又可用石蜡包埋组织作回顾性研究。③所需样本量少,可用活组织细针穿刺和细胞涂片。④应用范围广泛,可对特定的基因 (如癌基因、病毒基因 )DNA 、 mRNA 的表

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