凝胶排阻色谱法研究阿胶中蛋白质及多肽相对分子质量分布规律.docxVIP

1886? 药物分析杂志 ChinJPharmAnal2009,29(11)凝胶排阻色谱法研究阿胶中蛋白质及多肽相对分子质量分布规律 汪冰 ,肖新月 ,程显隆 ,田守生 ,林瑞超 3.山东东阿阿胶股份有限公司研究所 ,聊城 252201)2*1131(1.中国药品生物制品检定所 ,北京 100050;2.山东省药品检验所 ,济南 250101; 摘要 目的 :建立阿胶中水溶性成分凝胶排阻色谱分析方法 ,研究阿胶中蛋白质及多 肽的相对分子质量分布规律 ,为阿胶质量评价提供依据。方法 :采用 TSK-GELG4000PWXL(7.8mm 300mm,平均孔径 500A),流动相为 0.05mol!L-1 磷酸盐缓 冲液 (pH=7.2),流速 0.4mL!min-1, 检测波长 280nm,以 -淀粉酶、胰岛素为标记物 , 室温下测定 16 个企业生产的 40 批阿胶样品 ,并应用 TQAnalyst 软件进行样品图谱主成分分析。结果 :发现阿胶含有的蛋白质及多肽的相对分子质量主要集中在 6 103~2 105,不同企业的产品中蛋白质及多肽的相对分子质量分布有一定规律。结论 :该方法准确、可靠 ,具有良好的重复性和稳定性 ,可用于阿胶中蛋白质及多肽的分析。测定结果反映出不同企业间 ,甚至同一企业不同批次产品有差异。提示阿胶原料与生产工艺值得注意 ,为保证阿胶质量稳定 ,应该进行生产过程控制。 关键词 :阿胶 ;水溶性成分 ;蛋白质及多肽 ;凝胶排阻色谱法 ;相对分子质量分布 ;主成分分析 中图分类号 :R917 文献标识码 :A 文章编号 :0254-1793(2009)11-1886-06 Studyonrelativemolecularmassdistributionofproteinandpeptide indonkey-hidegluebygelexclusionchromatography WANGBing,XIAOXin-yue,CHENGXian-long,TIANShou-sheng,LINRui-chao (1.NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts,Beijing10005 0,China; 2.ShandongProvinceInstituteforDrugContro,lJinan250101,China; 3.InstituteforDrugControlofShandongDongEEJiaoCO.LTD.,Liaocheng252000,China)2 1*131 Abstract Objective:Todevelopagelexclusionchromatographymethodforstudyofrelative molecularmassdistri butionofproteinandpeptideindonkey-hideglue.Methods:GPCwasperformedonaTSK-GELG4000PWXLcolumn(7.8mm 300mm,averageporesize500A)with0.05mol!L -1 - 1phosphatebufferedsolution(pH7.2)attheflowrateof0.4mL!min,anddetectionat280nm.Re sults:Relativemolecularmassofproteinandpep tideindonkey-hideglueisintherangesof6 10-2 10,andthereareregularpatternintherelativemolec ularmassdistributionofproteinandpeptideindonkey- hideglue.Conclusion:Thedevelopedmethodisaccuratewithhighrepeatabilityandstability, whichcanbeusedfortheanalysisofproteinandpeptideindonkey- hideglue.Theresultshowsthattherearedifferenceinproductsamongdifferentmanufacture,ev enamongdifferentbatchs,whichcausedbydifferentproductiontechnique.Thecontrolofprod uctproductionprocessisveryimportanttoensurethequalityofdonkey-hideglue. Key