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小鼠胚胎切片原位杂交
小鼠胚胎切片原位杂交
(一)主要试剂及配制方法:
(一)主要试剂及配制方法:
a) 10 PBS 0.5 L 1L 29.22 g
a) 10 PBS 0.5 L 1L 29.22 g
原位杂交用 × 储存液 ( 体积配方):向 烧杯中依次加入
原位杂交用 × 储存液 ( 体积配方):向 烧杯中依次加入
NaCl 13.86 g NaHPO ·12H O 1.763 g NaHPO ·2H O 400mL ddHO
NaCl 13.86 g NaHPO ·12H O 1.763 g NaHPO ·2H O 400mL ddHO
, 和 ,然后加入 充分搅
, 2 4 2 和 2 4 2 ,然后加入 2 充分搅
2 4 2 2 4 2 2
NaOH pH 7.4 ddH
NaOH pH 7.4 ddH
拌溶解,用固体 将 调节至 ,然后加入
拌溶解,用固体 将 调节至 ,然后加入 O 0.5 L
O 定容至 0.5 L,最后各组分终浓度
2 定容至 ,最后各组分终浓度
2
NaCl 1.3mol/L Na
NaCl 1.3mol/L Na
为 ,
为 , HPO 70mmol/L NaH PO 30mmol/L
HPO 70mmol/L NaH PO 30mmol/L
, ,高压灭菌后室温保存备用;
2 4 , 2 4 ,高压灭菌后室温保存备用;
2 4 2 4
b) 1 PBS 10 PBS 10
b) 1 PBS 10 PBS 10
× 工作液:将 × 储存液用灭菌水稀释 倍即可;
× 工作液:将 × 储存液用灭菌水稀释 倍即可;
c) 10 10g ddH O DEPC ddH O
c) 10 10g ddH O DEPC ddH O
×甘氨酸溶液:称取甘氨酸 溶于 或 水中,最后补足 定
×甘氨酸溶液:称取甘氨酸 溶于 2 或 水
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