实验七鸡基因组pcrrflp分析.pptVIP

动物遗传学实验 实验七鸡基因组的 PCR-RFLP分析  、实验方法 、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR扩增 3、内切酶消化PCR产物 4、琼脂糖凝胶电冰(检测基因型)  鸡DNA的获取 1、鸡翅下静脉采集全血;2%EDTA抗凝; 2、DNA提取 裂解细胞核(红细胞+白细胞) 酚氯仿去除蛋白质 酶解RNA 获取DNA  PCR扩增 1、引物设计( Genbank); 2、聚合酶链反应( polymerase chain reaction, PCR)  PCR反应体系 DNA模板 dNTP Taq dna聚合酶 引物 Mg2+ 缓冲液  PCR反应程序 预变性94℃3~5min 35循环: 变性94℃ 30s-Imin 退火50~65℃30~60s 延伸72℃1~2m 后延伸72℃5-10min  PCR产物电泳检测结果  内切酶消化PCR产物 PCR产物+缓冲液+内切酶 5-TCATGA-3 3’- AGTACT5  电泳检测基因(1 B 电泳图谱 A BB AB  电泳检测基因(2) M TT CT CC TT CTCT TT M AA GA AA GG GAGA GG 世“斜 〓·〓〓