乙烯利对低温胁迫下日本结缕草叶绿素代谢通路的影响.pdf

摘要 摘要 本文以日本结缕草 （Zoysiajaponica）为试验材料，研究乙烯利对结缕草低温胁 迫下叶绿素代谢通路的影响，通过生理指标检测、叶绿素代谢相关酶活性和基因表达 分析，探究乙烯利在低温胁迫影响日本结缕草叶绿素代谢的关键调控酶和基因。研究 发现，喷施适宜浓度范围的乙烯利可以缓解日本结缕草低温胁迫时的胁迫伤害，减少 低温胁迫时的叶绿素损失。某些关键调控基因能够为后续运用生物技术手段调控日本 结缕草叶绿素含量的研究提供靶基因和研究基础。具体研究结果如下： （1）对日本结缕草喷施 100mg/L-200mg/L 浓度的乙烯利可以显著提高日本结缕草 在低温胁迫下的生长密度和叶绿素含量，还可以在低温恢复过程中显著提高叶片复绿 的效果，对延长日本结缕草绿期、提高坪观质量有重要的实用价值。 （2）常温条件下喷施乙烯利52 天后，日本结缕草电导率下降，说明常温条件下喷施 乙烯利对日本结缕草没有产生胁迫伤害并通过增强叶片细胞膜稳定性，有利于应对胁 迫。低温处理导致叶绿素含量和相对含水量的显著下降，电导率大幅上升。乙烯利处 理可以减少低温条件下叶绿素的损失，降低相对含水量的下降幅度和电导率的上升幅 度。表明喷施乙烯利可以缓解日本结缕草的低温伤害。 （3）常温喷施乙烯利后52 天，结缕草植株累积大量可溶性蛋白，而可溶性糖含量降 低。低温处理降低日本结缕草可溶性蛋白和可溶性糖含量，促进脯氨酸含量显著上升。 表明日本结缕草响应低温胁迫累积的主要渗透调节物质是脯氨酸。乙烯利处理可以通 过提高日本结缕草脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白的含量，调节细胞渗透势，减小低 温损害。 （4）低温处理在蛋白和基因表达两个水平调控和影响日本结缕草叶绿素含量，低温 胁迫下叶绿素合成速率下降而降解速率上升，最终导致叶绿素含量下降。具体表现在， 叶绿素合成前体酶ALAD 活性下降和叶绿素合成基因如ZjALAD、ZjHEMD 、 Zj URO-D2、ZjCPOX、ZjMgCH1、ZjMgCH3、ZjCHLM、ZjNADPH1、ZjNADPH2 基 因表达量下调；叶绿素降解途径相关酶MDcase 和RCCR 活性升高，ZjRCCR 基因表 达量上调导致叶绿素降解加快。乙烯利处理抑制叶绿素降解途径相关基因的上升，抑 制MDcase 和RCCR 的酶活性，降低叶绿素的降解速度，缓解低温条件下叶绿素损失。 （5）叶绿素b 具有吸收、传递光能的作用，而叶绿素a 除了吸收传递光能之外，有 I 摘要 助于光能的转化，促进有效光合效率，增加有机物积累，提高植物抗寒性。低温处理 使日本结缕草叶绿素a/b 的值显著下降，主要原因是ZjOsCAO基因的表达量增加， 加快了叶绿素b 的合成，而ZjNYC1基因的表达量的下降抑制了叶绿素b 向叶绿素a 的转化。喷施乙烯利可以提高低温条件下日本结缕草叶绿素a/b 的值，主要原因是 ZjOsCAO基因表达量显著下降，抑制叶绿素b 合成。ZjNYC1基因表达量上升，加快 了叶绿素b 向叶绿素a 的转化。 关键词：乙烯利，日本结缕草，低温胁迫，叶绿素，叶绿素代谢通路，实时荧光定量 PCR II 目录 目录 1引言 1 1.1叶绿素概述1 1.2 叶绿素代谢的意义2 1.3 叶绿素代谢途径2 1.3.1叶绿素合成通路3 1.3.2 叶绿素降解通路5 1.4 叶绿素代谢调控5 1.4.1 亚细胞组织空间调控6 1.4.2 激素调控7 1.4.3ALA 物质调控7 1.4.4Mg 分支调控8 1.4.5 基因