最新 色谱峰,色谱柱与参数.docxVIP

色潸峰及其養数 色潸峰及其養数 柱效 HETP = HETP = L N =梆妃瑞旅懺 . WJF逊齒硕磁 3主釜 期 铲峥縞 *=^wst- 柱效常常是指塔扳数「这种表彼方法是、lartin和Syn驴挺宙来的抑他们把 披分忻物在两和之间的平衡和分馅理论联亲虚一起审怏田这种方法把色谱柱 分为着羽期稣A.样晶纽分 bi卩订 如??#91?定檳義》沁M 间进 甸_细叫瓠 蹄C13淞的觀良豪曲奏平鹭的枕裁也 s 耐 觀 gw跆1WS1R晦耐 上向列出了计算桂效的处式「他们是从分配理论和随机统计学推倒出来的, 对4.6 x 100 mm裝5 pm填料的色谱柱典型桂救律5000到毎000培板数之 何卜自然/色谱峰的塔板数越髙分敬性越小总 理论塔板数常用于对给定方法的色谱村.确定其柱敛?方法的开发渚要决定当 色谱林的林效降低到某一预宦数值乏后就不能再昇 这时就魏垫换新的色谐 柱了. 在理恕的情况卜，色谱峰感该足髙斯峥或对称山仁 但足由于超柱勢W 样品 在网定郴上的吸附或色谱柱康不正常.使色谱峰岀现拖疋。可UM吏用不对称 公式计算色锻眸的疥对称度，上面所列公式足在分析中所用公武的一种卩 和 柱效的 公旣一桦渥 方法认证人 员 以决定当 不对称度超过 某一数值时这一方 法无敢：一繼当平对称歷览3襲更高时就平适合于积分和定蛍分折。 ? ? ? ? ?T . ? . L ? . 分离度 总起衣讲.也响邑谱昨之间!分備度的凶索仃〔介?它们是客吊,打黄口选抒 性悝捉潮桂效.N伯谱邺尖锐。主粪足尬谱柱爬度r类型“和颗料应大小 徨林底_罔障.增加暮lb氐冷 是僅酋腳?綸崛|話眸一握麗册區Th 左饗是 魏刹相刑讎爾hnul副咦??是歿 愉此靠無 一些还是暄离远 程主墓艮健合相*施勒相利温度控制这一因索. ? rfj. J 75 - * | u □ n n J FQQ 却m桃网肌 Moto的 册和卿积. wu u … ’ 缩短柱长但/)同时减小粒度⑴历能: 一保持分离度 -缩短分祈时阖 -减少辨利用呈 UW HPWrff UW HPWrff I:面的图表说明减小颗粒度即使縮短柱忙仍可以保持原有的柱效拿4.6 K 250 nmi? .5 pin 色谱柱和 I:面的图表说明减小颗粒度即使縮短柱忙仍可以保持原有的柱效拿 4.6 K 250 nmi? .5 pin 色谱柱和 4.6 X150 nui). 塔板数.試优点是降低分折时间节约潴剂? 3.5 pm色谱柱都具有20, 0 注*： 3.5 gm M粒度的填料可以便用2 urn的沙芯过滤3L这一过滤塞比便用0.5 Mm it逮寒的优点是不易被小颗粒杂质堵塞° 色谱柱直径 保留值和卑祁降低誨停B就降低 柱尺寸4/6 x 150 mm1.0mL/min3.0 x 柱尺寸 4/6 x 150 mm1.0mL/min 3.0 x 150 mm0.4mL/min 2J x 150 mm 0.2mL/min 死体积〕 餉i4I 1.50 0.64 0 28 M ■ — OCT ? 二Q — ?A T瓷-十々 k?3 ks5 343 137 69 -cPSpXb mnMf) VM 上面的数期说明从小 内径色谱林洗脱出来的色港峰其容积很小F峰扩散也很 小?阂此被稀释的稈疫很小 死时间（dead time , tO）--不保留组分的保留时间。即流动相（溶剂）通过色 谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。 fj umi L| r ml， PL 1IUU 死体积（dead volume，V0）--由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占 据的空间。它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被 流动相占据，Vm ）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有 Vm参与 色谱平衡过程， 其它3部分只起峰扩展作用。 为防止峰扩展， 这3部分体积应 尽量减小。V0 = F X t0 （F为流速） min E虑瘋建拘EBOniui E 沽林浦.速的20% ? jllLv 面 裝填5 11111 亍十 4.6 itLEii ■餐 装轨5 pm塌料的4,6 mm i孔色卸 板诞，且有祐同山泾色谱桂宴拗打R片问样乩血述?琳独截面比 鼻郁裁折财为i^Dlll ■ 色谕旌需甕守滴rnL .绻 2 -1. huh F 亘F少使用UFffl陳出螫H Flow Re?；* “ Flow 何at亀 Column Ld? (5u.m Particles) Flow mUmin 人 4-fi. 1 -2 3.0 0.4 - Q：8 2J - 0.4 _ IQ 二 03 屋橄戸屉直的葆覇找序 % s ? , o1 ° ? % ° wt ° co -，r? 击石 q? 口 祥减分子的錯构会沟你抛供一个洗脱桃序的贱