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细胞工程知识点 植物细胞工程 理论基础(原理)： 全能性表达的难易程度： 受精卵〉生殖细胞〉干细胞〉体细胞；植物细胞〉动物细胞 植物组织培养技术 过程：离体的植物器官、组织或细胞 一-愈伤组织 一-胚状体 一-植物体 名称 过程 形成体特点 J 口乔举 光 脱分化 由外植体脱分化为愈 伤组织 生长素与细胞分裂素 的比例 避 光 再分化 由愈伤组织分化为_ 有根、芽或有生根发芽的能 力 上述比例 需 光 营养生 长 生殖生 长 发育成完整的植物体 由根、茎、叶、花、果实、 种子组成 自身产生各种激素 需 光 用途：微型繁殖、作物脱毒(材料： )、制造人工种子(培养至)、 单倍体育种、细胞产物的工厂化生产(培养至 )。 地位：是培育 转基因植物、植物体细胞杂交 培育植物新品种的最后一道工序。 植物体细胞杂交技术 (1)过程: 注：杂种细胞的染色体数等于两个杂交细胞的 原理： 诱导融合的方法：物理法包括 等。 化学法一般是用 作为诱导剂。 意义：。 动物细胞工程 动物细胞培养 概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ，将它分散成 ,然 后放在适宜的 中，让这些细胞 。 动物细胞培养的流程：取动物组织块( 的器官或组织)剪碎r 用 处理分散成 单个仑田胞 制成 转入培养瓶中进行 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续 c 原代培养(10代以内)：遗传物质 传代培养(10代以后)：遗传物质 细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就 ，称为 (只有 一层细胞)。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞就 会，这种现象称为— 动物细胞培养需要满足以下条件 无菌、无毒的环境：培养液应进行 处理。通常还要在培养液中添加一定量 的,以防培养过程中的污染。此外，应: 防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、 、无机盐、等。通常 需加入 等天然成分。 温度：适宜温度：哺乳动物多是 ; pH: 。 气体环境：95%+ 5%。 Q是 所必需的，CO的主要作用 动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、 、、培养 医学研究的各种细胞。 (6)植物组织培养与动物细胞培养的比较 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞全能性 细胞增殖 培养基的物理性质 培养基的成分 结果 新的植株或组织 新的细胞系或细胞株 应用 微型繁殖；作物脱毒；生产人 工种子；生产细胞产物 蛋白质生物制品的生产；检测 有毒物质等 条件 均需无园操作、需适且的温度、 pH、氧气等条件  两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减 数分裂。 植物组织培养最终产生新个体，体现了细胞的全能性； 动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现细胞的全能性。 动物体细胞核移植技术和克隆动物 哺乳动物核移植可以分为胚月度|胞核移植(比较容易)和体细胞核H性_(比较难)。 (2)选用去核卵 (2)选用去核卵(母)细胞的原因：卵 营养丰富。 (母)细胞比较大，容易操作；卵 (母)细胞细胞质多, i?虫 i?虫细胞 1￥期低时 另一头母母羊的于富 生 尤隆绯羊?多利. (3)体细胞核移植的大致过程是： (右图)a为核移植b胚胎移植 体细胞核移植技术的应用： 加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育； 保护濒危物种，增大存活数量； 生产珍贵的医用蛋白； 作为异种移植的供体； 用于组织器官的移植等。 体细胞核移植技术存在的问题： 克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。 动物细胞融合 动物细胞融合也称 ,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有原来 细胞遗传信息的 核细胞，称为 动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物 原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。 动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、 肿瘤和生物新品种培育的重要手段。 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用法 植物体细 胞杂交 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 物理法：离心、振 动、电激 克服了远缘 杂交的正亲 和性，获得杂  化学法：聚乙二醇 种植株 动物细胞 融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后诱 导细胞融合 物理法：离心、振 动、电激 化学法：聚乙二醇 生物法：灭活病毒 制备单克隆 抗体的技术 之一 实质 改变遗传物质、产生新的性状、获得细胞产品，使后代具有双亲的特性 单克隆抗体 抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种 。从血清中分离出的抗体具 有。 单克隆抗体的制备过程： 杂交瘤细胞的特点：既能大量 ，又能产