沙棘木蠹蛾幼虫EhHsp90-1和EhHsp90-2基因的克隆表达及EhHsp90-1基因RNA干扰体系的构建.pdfVIP

摘要 摘要 沙棘木蠹蛾 Eogystia hippophaecola （Hua, Chou, Fang Chen ）隶属鳞翅目 Lepidoptera、木蠹蛾科Cossidae 的Eogystia 属，是中国特有的严重危害内蒙、辽宁、 宁夏等地区人工沙棘林Hippophae rhamnoides 生态和经济效益的钻蛀性害虫，主要以 幼虫取食沙棘的根部和干部，能够在沙棘根部越冬，具有较强的耐寒能力。而热激蛋 白90 （Heat-shock proteins 90，Hsp90 ）与昆虫的高低温耐受能力密切相关。为了揭示 沙棘木蠹蛾幼虫耐受寒冷的适应机制，本研究基于转录组深度测序结果筛选出两条 Hsp90 基因并进行克隆，分别命名EhHsp90-1 和EhHsp90-2 ；利用qRT-PCR 技术分析 了两个 Hsp90 基因在沙棘木蠹蛾幼虫遭受低温胁迫时的表达规律；将克隆测序正确 的EhHsp90-1 和EhHsp90-2 基因连接到pET30a 原核表达载体且成功表达目的蛋白； 比较不同 dsRNA 注射剂量和干扰时间对 EhHsp90-1