双光子显微镜.pptVIP

谢谢大家，感谢我的三位导师和课题组的同学们。 Widefield Confocal Multiphoton 白炽灯的原理 电子吸收能量跃迁到高能级 高能级不稳定 高能级电子回到基态，发出光子 单光子吸收与荧光显微镜 荧光分子吸收一个光子跃迁到高能级 高能级电子回到基态，发出荧光 多光子效应 高能量的激发光照射荧光分子，荧光分子短时间内吸收两个光子跃迁到高能级 高能级电子回到基态，发出荧光 多光子显微镜 双光子显微镜（Leica） 多光子显微镜优势—高分辨率 双光子效应是低概率事件，需要很高的激光能量，因此只有焦点处会发生 需要采用高能量、短脉冲（防止样品发热、提高信噪比）的飞秒激光器 双光子显微镜 宽场显微镜 多光子显微镜优势—高分辨率 未发生双光子效应的区域，不会激发荧光 多光子显微镜优势—大深度 双光子显微镜穿透深度深与双光子效应无关，而是因为双光子显微镜采用的是长波长（红外）的激光 因此，三光子激光器的波长更长，穿透深度更深 多光子显微镜优势—大深度 选择波长应处于组织吸收较少的窗口，一般选择700-900nm之间 多光子显微镜优势—伪彩色 多波长荧光的叠加 多光子显微镜研究—脉冲压缩 提高信噪比 多光子显微镜研究—自适应校正 减少组织散射的影响 提高分辨率 谢谢大家，感谢我的三位导师和课题组的同学们。