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细胞工程(一)
1?甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分 A,乙含有效成分B。某
研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题:
TOC \o 1-5 \h \z 为了培育该新型药用植物, 可取甲和乙的叶片,先用 酶和 酶
去除细胞壁,获得具有活力的 ,再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合
细胞进一步培养形成 组织,然后经过 形成完整的杂种植株。这种培
育技术称为 。
上述杂种植株属于多倍体,多倍体是指 。假设甲与乙有性杂交的
后代是不育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是 。
这种
杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的 __
等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
2?为了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列 问题:
外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为 。
在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、 蔗糖浓度和pH的变化如右图所示。细胞干重
在12d后下降的原因有 ;培养液中蔗糖的作用是
ffl 4星更
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0 ? * * 1 0
2 4 6 8 10 12 14 16
时间(d)
多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞
经 处理,会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目,压片前常
采用纤维素酶和 酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后,观察到
染色体数为8n的细胞,合理的解释是 、 。
为了更好地获得次生代谢产物,生产中采用植物细胞的固定化技术,其原理与酵
母细胞固定化类似。下列说法正确的有 (填序号)。
选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋②必须在光照条
件下培养
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③培养过程中需通空气 ④固定化后植物细胞生长会变慢
3 ?铁皮石斛是我国名贵中药,生物碱是其有效成分之一,应用组织培养技术培养铁皮石
斛拟原球茎(简称PLBs,类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下:
不同时间取样、检测
不同时间取样、检测
在固体培养基上,PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图 17所示,请回
0.0350.030
0.035
0.030A
0.025 A
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0.015 $
0.010 礬 ■0.005 划
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rbiDs工X i兀尽丿 —生物戎含童(光照)
?…?PLBs重量(黑暗)
10
8
6
4
2
o 1020 3° 4。 50
6o
培养时间(天)图17
⑴选用新生营养芽为外植体的原因是 ,诱导外植体形成PLBs的过程称
(2) 与黑暗条件下相比,PLBs在光照条件下生长的优势体现在 , ,—
(3) 脱落酸(ABA能提高生物碱含量,但会抑制 PLBs的生长。若采用液体培养,推测添
加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测 在设计实验方案是探讨了
以下问题:
ABA的浓度梯度设置和添加方式:设 4个ABA处理组,1个空白对照组,3次重复。因
ABA受热易分解,故一定浓度的无菌 ABA母液应在各组液体培养基 后按比例加入。
实验进程和取样:实验50天完成,每10天取样,将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再
测定生物碱含量。如初始(第 0天)数据已知,实验过程中还需测定的样品数为 。
依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间:当某3个样品(重复样)的 时,
其对应的ABA浓度为适宜浓度,对应的培养时间是适宜培养时间。
DHA对脑神经发育至尖重要。以/I B两种单细胞真核藻为亲本,利用细
胞融合技术选育
高产DHA融合藻。两种藻特性如下表。据表回答:
亲本藻
优势代谢类型
生长速率(g/L?天)
固体培养基上菌洛直径
DHA含量(%。)
A藻
自养
0.06
小
0.7
B藻
异养
0.14
大
无
选育的融合藻应具有A藻 与E藻 的优点。
(2 )诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻,其目的是获得 。
(3)通过以下三步筛选融合藻,步骤 可淘汰B藻,步骤 可淘汰生长速成率
较慢的藻落,再通过步骤 获取生产所需的融合藻。步骤a :观察藻落的大小步骤。
b:用不含有机碳源(碳源一一生物生长的碳素来源)的培养基进行光照培养步骤。 c :测定
DHA含量。
(4 )以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组试验,结果如下图。
■ LHAII7
■ LHA
II
7
睫“舉罠比即
BO
A ? ? ? * #
r y_ a E i * _
则 MW*
甲组条件下,融合藻产生〔H〕的细胞器是 ;丙组条件下产生ATP的细胞器是
与甲、丙两组相比,乙组融合藻生长速率较快, 原因是在该培养条件下 。甲
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